小黑楊PoptrCYCD1；1與擬南芥CYCD1；1、CYCD2；1、CYCD3；1基因在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、U n i v e r s i t yC o d e ：1 0 2 2 5R e g i s t e rC o d e ：S 16 6 5 9D i s s e r t a t i o nf o r t h e D e g r e e o f M a s t e rT h e p r e s s i o nf —p t r , “ C ee x p r e s s l o n0 ，' o p t r t 1 ；1f r o m

2、p o p l a ra n dC Y C D l , “ 1 ，C Y C D 2 ；1 ，C Y C D 3 ；1f r o m A r a b i d o p s i sC a n d i d a t e ：' ' 一 - ? ‘t h a l i a n a i nN i c o t i a n a t a b a c u mS u p e r v i s o r ：A s s o c i a t eS u p

3、e r v i s o r ：A c a d e m i c D e g r e e A p p l i e df o r ：S p e c i a l i t y ：D a t eo f 0 r a lE x a m i n a t i o n ：U n i v e r s i t y ：D a i L i j u a np r o f ．Q uG u a n z h e n gM a s t e rF o r e s tT r e

4、eG e n e t i c sa n d B r e e d i n gJ u n e ，2 0 1 6N o r t h e a s t F o r e s t r y U n i v e r s i t yA b s t r a c tA b s t r a c tC e l ld i v i s i o ni s o n e o ft h eb a s i c c h a r a c t e r i s t i c so fo

5、r g a n i s m s ，w h i c hp l a y s a ne x t r e m e l yi m p o r t a n t r o l e i n t h e p r o c e s s o f p l a n t g r o w t h a n dd e v e l o p m e n t ．C e l l c y c l e a n dg r o w t hr e g u l a t i o nc a n n

6、 o tb es e p a r a t e d f r o ma c l a s so f i m p o r t a n tc e l ld i v i s i o n c o n t r o lf a c t o r s 一一c y c l i n s ．C Y C D l ；1 ，C Y C D 2 ；1 ，C Y C D 3 ；1 ，a sa r e g u l a t o r yf a c t o r , h a sb e

7、e ni d e n t i f i e di nr e g u l a t i o no f c e l lc y c l e ．I no r d e rt o a d d r e s s t h e f u n c t i o n so fC Y C D ，t h eP o p t r ；C Y C D l , “ 1f r o mP o p u l u sa n dA t C Y C D l ；1 、A t C Y C D 2 ；

8、1 、A t C Y C D 3 ；1 f r o mA r a b i d o p s i sw e r e i n t r o d u c e d i n t oN i c o t i a n at a b a c u m ．T h em a i n c o n c l u s i o n s a r e a sf o l l o w s ：1 ．p E R 8 一G F Pw a s c o n s t r u c t e da

9、n d w a s t r a n s f o r m e d i n t ot o b a c c o s ．T h et r a n s g e n i cp l a n t sw e r ei n d u c e d w i t hd i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n sa n d d i f f e r e n t t i m e so fe s t r o g e n ．T h

10、ee x p r e s s i o no fP o p t r ；C Y C D l ；1i nt r a n s g e n i ct o b a c c o w a s t e s t e db yu s i n g q R T - P C R a n dN i g h t S H A D Ep l a n t si n v i v oi m a g i n gs y s t e m ．a(chǎn) n d t h er e s u l t

11、 ss h o w e d t h a t t h eG F P g e n ea p p e a r e di n t h eh y p o c o t y la n dr o o tt i pc e l l so ft o b a c c o ．I ts h o w e dt h a t t h eX V E c h e m i c a li n d u c t i o ns y s t e mi n t o b a c c oc

12、o u l da l s o b e u s e dt o c o n t r o l t h e e x p r e s s i o no ft a r g e t g e n e e f f i c i e n t l yb yt h e i n d u c t i o no fe s t r o g e n ．2 ．p E R 8 一P o p t r ；C Y C D l ；1 a n d p E R 8 一P o p t r

13、, ' C Y C D l ；1 一R N A i w a s c o n s t r u c t e d a n dt r a n s f o r m e d i n t o t o b a c c o ．T h e t o b a c c op l a n t s w e r e t r e a t e d b y e s t r o g e n ，a n d t h e r e w e r es i g n i f i c

14、 a n t d i f f e r e n c e sb e t w e e n t h et r a n s g e n i ca n d w i l dt y p e ，w i t hi n c r e a s e dl e n g t ho f t h es t y l e ，l a r g e ro f p e t a la n d o v a r y ．W h e n p E R 8 - P o p t r ；C Y C D

15、 l ；1 一R N A i w a s i n t r o d u c e di n t o3 5 S ：：P o p t r ；C Y C D l ；1 t o b a c c o ，s o m e l i n e s s h o w e d l o we x p r e s s i o n l e v e l a n de x h i b i t e dr e s t o r a t i o n o fp h y n o t y

16、p e ．T h e s er e s u l t ss h o w e dt h a tt h eo v e r e x p r e s s i n go fP o p t r , “ C Y C D l ；1a n d r e s u l t e di nt h ec h a n g e s o f p h e n o t y p e i nt r a n s g e n i cl i n e s ．3 ．A t C Y C D l

17、 ；1 ，A t C Y C D 2 ；1 ，A t C Y C D 3 , ' 1 w e r e c o n s t r u c t e d i n t o p R O K I I v e c t o r a n dt r a n s f o r m e d i n t o t o b a c c o s ．T h e r e s u l t s o f q R T - P C Rs h o w e dt h e m R N

18、 A o fA t C Y C D l , “ 1 ，A t C Y C D 2 ；1a n dA t C Y C D 3 ；1w e r et r a n s c r i b e di nt r a n s g e n i ct o b a c c o s ．T h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s i nt h ef l o w e r sb e t w e

19、 e nt h et r a n s g e n i ca n dw i l dt y p e ，w i t hi n c r e a s e dw i d t h o ft h ec o r o l l a ，l e n g t h o f p e t a l ，s e p a l a n d s e e d p o d ，w h i c h s u g g e s t e d t h e o v e r e x p r e s s

20、i o n o fA t C Y C D l ；1 、A t C Y C D 2 ；1 、么f C Y C D 3 ；1 h a d a n o b v i o u si n f l u e n c e o nt h e d e v e l o p m e n to ft r a n s g e n i ct o b a c c o ．4 ．C o m p a r e dw i t ht h ew i l dt y p e ，t h e

21、t r a n s g e n i cp l a n to v e r e x p r e s s i n g A t C Y C D 3 ；1s h o w e da l t e r e dt r a n s c r i p t i o nl e v e l so f SN t l C K 、N t C D K a n d N t C D K C ．T h e r o o t t i pc e l l so f t r a n s g

22、 e n i cp l a n t sw e r es m a l l e r , t h e s t e m sw e r e c u r v e d ，t h el e a v e s w e r ec u r l e d ，a n dt h e s e e d sb e c a m es m a l l e r ．T h ep a r a f f i nt e s to ft r a n s g e n i cp R O K I

23、I - A t C Y C D 3 , ' It o b a c c oi n c r o o k e d s t e ms e c t i o ns h o w e d t h en u m b e r o fc a m b i a lc e l l sa n d x y l e mc e l l so f t r a n s g e n i cp l a n t si n t h eb e n tp a r tw a s．I