仔三代低硒大鼠神經(jīng)發(fā)育及海馬突觸超微結(jié)構(gòu)改變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的:碘缺乏作為引起智力損害的因素已得到公認(rèn),但經(jīng)過二十余年的補(bǔ)碘,典型克汀病基本得到控制,但仍有多量亞克汀病弱智患兒出現(xiàn)。大量的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)許多缺碘地區(qū)同時(shí)伴有缺硒,硒作為亞克汀病的碘外因素越來越引起研究者們的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)利用膳食性低硒大鼠模型,從神經(jīng)行為發(fā)育觀察和與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)的海馬的突觸結(jié)構(gòu)的角度,研究低硒對(duì)大鼠行為發(fā)育及學(xué)習(xí)記憶能力的影響作用。
　　材料與方法:利用課題協(xié)作小組已建立的連續(xù)人工膳食性低硒動(dòng)物模型第

2、三代仔鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)共分為4組:補(bǔ)硒補(bǔ)碘對(duì)照組、低硒組、低碘組和低硒低碘組。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),從仔三代大鼠出生開始,在不同日齡完成相應(yīng)的早期神經(jīng)行為發(fā)育指標(biāo)的檢測(cè),Morris水迷宮測(cè)定大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,利用透射電鏡攝取各組大鼠海馬CA3區(qū)Gray-Ⅰ型突觸照片,采用體視學(xué)方法測(cè)量突觸結(jié)構(gòu)參數(shù),考察突觸形態(tài)的可塑性.
　　結(jié)果:
　　1.早期行為發(fā)育指標(biāo)的檢測(cè)中:平面翻正實(shí)驗(yàn):4天時(shí),低硒低碘組仔鼠的評(píng)分明顯比對(duì)照組低(P

3、﹤0.01),在7天時(shí),各組間平面翻正評(píng)分無顯著性差異。在聽覺驚愕反射中,低碘組與低硒低碘組的仔鼠其陽性日較對(duì)照組略有延后。F3代仔鼠在前肢握力實(shí)驗(yàn)中,在12天時(shí),低硒低碘組仔鼠前肢握力持續(xù)時(shí)間明顯較對(duì)照組短,14天時(shí),低硒低碘組和低硒組也比對(duì)照組短且差異有顯著性(P值分別為0.000,和0.001)。 F3代仔鼠在第12天的行走能力實(shí)驗(yàn)中,低碘組、低硒低碘組均比對(duì)照組的評(píng)分顯著低,( P值分別為0.01和0.007)。在14天時(shí)沒有統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)差異。
　　2.Morris水迷宮行為測(cè)定實(shí)驗(yàn):雌性大鼠在Morris水迷宮的定位航行實(shí)驗(yàn)中,低硒低碘組九個(gè)時(shí)段的平均潛伏期比對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(P﹤0.05),而第一時(shí)段與第九時(shí)段潛伏期的差值明顯減小(P﹤0.01)。在尋找隱蔽站臺(tái)所采取的策略上,與對(duì)照組相比較,低硒組、低碘組和低硒低碘組所采取的趨向式和直線式策略均無顯著性差異。雄性大鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中,無論是九個(gè)時(shí)段的平均潛伏期還是第一時(shí)段與第九時(shí)段潛伏期的差值,其他三組與對(duì)

5、照組相比都沒有明顯差異,在尋找隱蔽站臺(tái)所采取的策略上,與對(duì)照組相比較,低碘組采取的直線式策略明顯減少(P﹤0.05)。在空間探索實(shí)驗(yàn)中,雄鼠在各象限停留時(shí)間各組之間無顯著性差異;雌鼠在各象限停留時(shí)間各組之間無顯著性差異,但對(duì)照組在目標(biāo)象限停留時(shí)間較其它三組長(zhǎng),在遠(yuǎn)離目標(biāo)象限停留時(shí)間短。從穿過原平臺(tái)所在位置的次數(shù)來看,各組雄鼠之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別,而低硒低碘組雌鼠較對(duì)照組穿過次數(shù)明顯減少(p﹤0.01)。
　　3.突觸結(jié)構(gòu)參數(shù):我們利用

6、電鏡對(duì)突觸結(jié)構(gòu)參數(shù)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),長(zhǎng)期膳食性硒、碘缺乏以及硒碘聯(lián)合缺乏的大鼠,其海馬CA3區(qū)的Gray-Ⅰ型突觸的PSD(突觸后致密物質(zhì))明顯變薄,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯的差別(P﹤0.01)。長(zhǎng)期膳食性低硒、低碘明顯降低海馬CA3區(qū)突觸界面曲率(p﹤0.01)。低硒低碘組突觸間隙明顯變窄(p﹤0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.綜合以上早期神經(jīng)行為發(fā)育指標(biāo),說明單純低硒、低碘以及硒碘水平同時(shí)降低對(duì)仔三代大鼠的神經(jīng)行為發(fā)育均有明顯影響.