皂莢抗癌有效部位的研究.pdf

1、一、研究目的皂莢(中藥植物藥)的抗腫瘤作用是在中藥抗腫瘤篩選研究中發(fā)現(xiàn)的，后經(jīng)抗腫瘤試驗(yàn)和臨床研究證實(shí)了皂莢總浸膏具有確切的抗癌效果。本研究的目的是在對(duì)皂莢總浸膏抗癌有效的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代分離方法，對(duì)總浸膏進(jìn)行分離和抗腫瘤篩選，確定皂莢的抗癌活性部位。對(duì)確定的有效部位進(jìn)行了提取純化工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性、抗腫瘤藥效學(xué)和毒理學(xué)的深入系統(tǒng)研究，通過上述研究對(duì)有效部位的抗癌效果和毒性作出了綜合評(píng)價(jià)。 二、研究方法及結(jié)果1、采用不同方法

2、將總浸膏分離成皂苷組分和非皂苷組分。 2、通過對(duì)皂苷和非皂苷二部分的動(dòng)物抗S180篩選試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)皂苷組分具有顯著的抑瘤作用，從而確定皂苷組分為有效部位。 3、以皂苷組分為指標(biāo)，通過三因素三水平的正交優(yōu)選試驗(yàn)，確定了皂莢皂苷部位的最佳提取工藝。 4、采用大孔樹脂對(duì)提取的粗皂苷部位進(jìn)行了純化分離研究，使有效部位中總皂苷含量約達(dá)60％，達(dá)到申報(bào)該類新藥有效組分含量應(yīng)大于50％的技術(shù)要求，純化后的皂苷部位稱“皂苷提取物”

3、。 5、按中藥新藥申報(bào)的技術(shù)要求，對(duì)皂苷提取物進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，制訂了皂苷提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及起草說明。 6、按中藥新藥穩(wěn)定性試驗(yàn)的要求，對(duì)皂苷提取物進(jìn)行了穩(wěn)定性試驗(yàn)考察，結(jié)果表明皂苷提取物室溫放置18個(gè)月，其質(zhì)量是穩(wěn)定的。 7、對(duì)皂苷提取物進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)，未見明顯毒性反應(yīng)，測得LD50為3.97±0.45g/kg，表明擬定的臨床服用劑量是安全的。 8、抗腫瘤藥效學(xué)試驗(yàn)：(1)對(duì)HL-60和SGC7

4、901細(xì)胞的抑制試驗(yàn)，體外抑瘤試驗(yàn)表明，皂苷提取物對(duì)上述二種細(xì)胞有顯著的抑制作用和劑量時(shí)間效應(yīng)關(guān)系，其24小時(shí)和72小時(shí)對(duì)HL-60細(xì)胞的LC50分別為30.36μg/ml和2.29μg/ml，對(duì)SGC7901細(xì)胞LC50分別為190.98μg/ml和6.29μg/ml，表明皂苷提取物有較穩(wěn)定的體外抗腫瘤效果。(2)抗腫瘤主要藥效學(xué)試驗(yàn)：對(duì)該藥物進(jìn)行抗小鼠S180、小鼠肝癌及對(duì)機(jī)體免疫功能影響的研究。結(jié)果表明該提取物對(duì)S180有顯著的抑

5、瘤作用，其抑瘤率達(dá)52.5％～67.8％(p＜0.01)，對(duì)小鼠肝癌亦有一定抑制作用(p＜0.01)，并能顯著延長荷瘤小鼠的生存時(shí)間，提高正常小鼠及荷瘤小鼠的非特異性免疫功能(p＜0.01)，對(duì)低劑量環(huán)磷酰胺有顯著的增效作用(p＜0.01)。 三、研究成果的創(chuàng)新點(diǎn)及意義1、皂莢的抗癌作用在國內(nèi)外為首次發(fā)現(xiàn)，屬創(chuàng)新性的新藥研究。皂苷活性部位的確定可做為創(chuàng)新性新藥申報(bào)；。對(duì)有效部位的分離和活性成分的確定，可發(fā)展成為中藥一類抗癌新藥。

6、 2、在國內(nèi)外首次對(duì)皂莢皂苷提取物進(jìn)行抗腫瘤藥學(xué)、藥理和毒理的系統(tǒng)研究，確定了本品的抗癌作用，為本品抗癌研究提供了完善的技術(shù)資料。 3、皂莢皂苷部位對(duì)S180的抑瘤率可達(dá)到67.8％，優(yōu)于對(duì)照組環(huán)磷酰胺(抗癌西藥)的抑瘤率50.36％(P＜0.05)，這在目前抗癌中藥和天然植物藥中是極其罕見的，從而打破了中藥抗癌療效不如西藥的傳統(tǒng)觀念。 4、在目前的抗癌中藥和天然藥中，有效成分多為生物堿、揮發(fā)油、多糖等，皂苷組分