hSIR2-SIRT1降低蒽環(huán)類抗腫瘤藥多柔比星的心臟毒性.pdf

1、多柔比星是一種臨床上常見的化療藥，它可以穿透細胞膜進入細胞，與染色質(zhì)結(jié)合，通過其平面環(huán)插入堿基對之間與DNA結(jié)合形成復(fù)合物，嚴重干擾DNA合成、RNA合成和蛋白質(zhì)合成，發(fā)揮抗腫瘤的作用。多柔比星的臨床應(yīng)用由于其對健康組織的毒性而受到限制，其中最顯著的副作用是劑量依賴的心肌病和充血性心力衰竭。
　　 多柔比星的心臟毒性，一種可能的原因是，多柔比星可以增加心肌細胞的氧化應(yīng)激水平以及引起DNA斷裂等，進而導(dǎo)致心肌細胞的凋亡；另一種可能

2、的原因是，多柔比星會破壞心肌細胞肌小節(jié)結(jié)構(gòu)，由于肌小節(jié)結(jié)構(gòu)的完整對于心肌細胞的功能至關(guān)重要，所以肌小節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞會導(dǎo)致心臟功能失常以及心肌病。
　　 我們實驗室之前的研究發(fā)現(xiàn)，NAD+依賴的三類組蛋白去乙?；窼IRT1可以影響心肌細胞的生存和凋亡，結(jié)合文獻報道，我們知道，SIRT1在一定劑量范圍內(nèi)的過表達，可以對抗心肌肥厚及衰老。很多研究表明，SIRT1可以在多種細胞和組織中發(fā)揮促生存的作用，其作用來自于其抗氧化應(yīng)激的能力和抗

3、凋亡的能力。蒽環(huán)類化療藥多柔比星也可引起細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)和細胞凋亡，這提示，SIRT1很有可能對多柔比星引起的心臟毒性有保護作用。
　　 為驗證我們的假說，我們首先用多柔比星處理原代心肌細胞和H9C2細胞，發(fā)現(xiàn)SIRT1的表達水平隨多柔比星處理時間的延長先升高再降低，細胞凋亡的標(biāo)志Cleaved Capase3表達水平也隨處理時間延長逐漸增加，并且其增加與SIRT1表達水平下降相對應(yīng)，說明SIRT1可能在這個過程中發(fā)揮了保護作用

4、。
　　 通過構(gòu)建SIRT1過表達的腺病毒和SIRT1干擾的腺病毒，感染大鼠原代心肌細胞，發(fā)現(xiàn)SIRT1過表達可以劑量依賴地降低多柔比星誘導(dǎo)的心肌細胞凋亡，而SIRT1干擾會明顯增加多柔比星誘導(dǎo)的心肌細胞凋亡，證實外源和內(nèi)源的SIRT1對于多柔比星引起的心肌細胞凋亡都有保護作用。
　　 當(dāng)對小鼠腹腔注射多柔比星時，其急性毒性會引起小鼠死亡。為說明SIRT1對這一過程的作用，我們對心臟特異性SIRT1H363Y轉(zhuǎn)基因小鼠腹

5、腔注射多柔比星。SIRT1H363Y為負顯性抑制型，其在心臟內(nèi)過表達會抑制內(nèi)源性SIRT1的活性。我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠在多柔比星給藥時的死亡率會明顯升高，說明當(dāng)小鼠心臟的SIRT1活性被抑制時，對于多柔比星的急毒性會更加敏感，提示SIRT1對于多柔比星在小鼠整體水平的急毒性也具有保護作用。
　　 綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)心肌細胞在多柔比星的刺激下，SIRT1表達水平先升高后降低，其表達水平的降低伴隨著細胞凋亡的增加；SIRT1過表達可以