核干因子在前列腺癌中的表達及其作用機制的初步研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文核干因子在前列腺癌中的表達及其作用機制的初步研究姓名：劉冉錄申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（泌尿外）指導(dǎo)教師：徐勇;張志宏20070501天津醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果前列腺癌標(biāo)本及P c - 3 、L N C a p 及D U l 4 5 細胞中都表達N S基因，N S 基因在前列腺癌中的表達水平顯著高于前列腺增生中的水平，N S 基因表達水平與前列腺癌的分化程度呈負(fù)相關(guān)，細胞分化程度越差，N

2、S 基因表達水平越高。結(jié)論前列腺癌中高表達N S 基因，N S 基因在前列腺癌的不良分化和惡性增殖中可能起著重要作用。第二部分N u c l e o s t e m i n 基因表達水平下調(diào)對P C 一3 細胞增殖能力的影響目的 探討N S 基因與前列腺癌惡性增殖的關(guān)系，為前列腺癌的基因治療探索新的靶基因。方法通過s h R N A 質(zhì)粒表達載體沉默P C 一3 f l t t 胞中N S 基因的表達，研究N S 基因水平下調(diào)后P C

3、一3 細胞形態(tài)、周期、增殖能力及凋亡的變化。結(jié)果N S基因在P C ．3 細胞中的表達水平下調(diào)后，細胞胞膜邊緣突起增多，更趨向于分化；s 期細胞的百分率降低， G 1 期的百分率升高；細胞的體外增殖速率明顯降低，在裸鼠體內(nèi)致瘤能力、腫瘤的生長速度及腫瘤的最終體積和重量也明顯降低，●細胞凋亡增多。結(jié)論N S 基因可能是前列腺癌P C 一3 細胞周期中G 1 ／S 檢查點的一個重要的調(diào)節(jié)因子，在P C 一3 細胞惡性增殖中發(fā)揮重要作用，N

4、S 可能是前列腺癌基因治療的理想靶基因之一。第三部分P C ．3 細胞N u c l e o s t e m i n 基因下調(diào)后全基因組表達譜的變化分析目的篩選與N S 相互作用的基因及可能的信號通路，探討N S 基因在前列腺癌中的作用機制。方法利用表達譜基因芯片技術(shù)分析P C 一3 細胞N S 基因下調(diào)后全基因組表達譜的變化，篩選與N S 相互作用的差異基因及信號通路，并利用實時熒光定量P C R 對重要差異基因進行驗證。結(jié)果篩選出了

5、2 1 9 個差異表達的基因，這些基因涉及到細胞周期、細胞增殖、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞凋亡及細胞分化等多個方面，重要差異基因被實時熒光定量P C R 進一步證實。N S 基因下調(diào)后主要引起1 N K 4 家族基因( P 1 5 ，P 1 6 ，P 1 8 ) 的上調(diào)和c y c l i nD 1 及H D A C l 基因的下調(diào)，主要作用點位于C D K 4 ／6 一C y c l i nD 和p R b - E 2 F 1 復(fù)合體。結(jié)論在基因