RECK基因在前列腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移中作用機(jī)制的研究.pdf

1、該課題從組織、細(xì)胞株、藥物刺激以及動(dòng)物模型四個(gè)方面研究RECK基因與前列腺癌發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移間的關(guān)系及其可能的作用機(jī)制.首先,利用RT-PCR 和Real-time PCR技術(shù),檢測(cè)發(fā)現(xiàn)前列腺的RECK表達(dá)量較正常前列腺組織標(biāo)本明顯降低(p<0.01),而MMP-2和MMP-9的表達(dá)明顯升高(p<0.01),同樣,前列腺癌細(xì)胞株(DU-145,LNCap,PC-3)中RECK基因表達(dá)量較良性前列腺增生細(xì)胞株BPH-1明顯降低(p<0.0

2、1),而MMP-2和MMP-9的表達(dá)明顯升高(p<0.01),另一方面,在蛋白水平利用Westem blot技術(shù)檢測(cè)提示前列腺癌組織標(biāo)本中RECK基因的表達(dá)量較正常前列腺組織標(biāo)本明顯降低,且前列腺癌細(xì)胞株DU-145、LNCap、PC-3中的RECK基因表達(dá)量較良性前列腺增生細(xì)胞株BPH-1表達(dá)量明顯降低(p<0.01).另一方面,我們應(yīng)用非甾體類(lèi)抗炎藥NS398刺激前列腺癌細(xì)胞株DU-145,應(yīng)用RT-PCR和Real-Time PC

3、R技術(shù)以及Western blot技術(shù)觀察不同藥物濃度刺激后細(xì)胞中RECK基因表達(dá)水平的變化,研究發(fā)現(xiàn):NS398對(duì)RECK基因的表達(dá)有明顯的誘導(dǎo)作用,而對(duì)MMP-2和MMP-9的表達(dá)則有明顯的抑制作用,且其發(fā)揮最大作用的藥物濃度為100μmol/L.最后,我們應(yīng)用前列腺癌細(xì)胞株DU-145種植于裸鼠皮下建立前列腺癌動(dòng)物模型,并應(yīng)用NS398喂養(yǎng)裸鼠,觀察用藥后裸鼠腫瘤組織內(nèi)RECK基因表達(dá)水平的變化,同樣利用上述技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),NS39

4、8喂養(yǎng)的動(dòng)物模型,其RECK基因的表達(dá)量明顯升高,而MMP-2和MMP-9的表達(dá)量則明顯降低(p<0.01).進(jìn)一步證實(shí)非甾體類(lèi)抗炎藥抗癌作用的機(jī)制可能是通過(guò)誘導(dǎo)RECK基因的表達(dá),降低MMP的表達(dá),從而發(fā)揮作用的.目前關(guān)于RECK基因與前列腺癌相互關(guān)系的許多問(wèn)題尚有待于進(jìn)一步解決.首先,RECK基因抑制MMP的具體機(jī)制有待于進(jìn)一步闡明,此外,對(duì)于不同期別的前列腺癌腫瘤組織中RECK基因的表達(dá)量及RECK基因表達(dá)量與腫瘤患者預(yù)后之間的關(guān)