雄性大鼠Inhibin α亞基的表達(dá)及其啟動子表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：雄性大鼠Inhibinα亞基的表達(dá)分析
　　 目的：確定雄性大鼠Inhibinα亞基的mRNA及蛋白在各種組織中有無表達(dá)及相對表達(dá)量。
　　 方法：選用成年SD雄性大鼠，10%水合氯醛麻醉后處死，立即取睪丸、附睪、腎、腎上腺及肝組織，采用免疫組化法和熒光定量PCR方法分別檢測Inhibinα蛋白和mRNA在大鼠各組織中的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：Inhibinα蛋白在睪丸

2、、附睪、腎、腎上腺組織中均有表達(dá)，在肝臟組織中無表達(dá)。InhibinαmRNA在各組織中的表達(dá)相對量依次為:腎>腎上腺>睪丸>附睪。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)從定性和定量兩方面檢測了Inhibinα亞基的表達(dá)情況，結(jié)果提示Inhibinα亞基不僅僅在生殖系統(tǒng)有表達(dá)，在其它系統(tǒng)也有表達(dá)。
　　 第二部分：Inhibinα啟動子真核表達(dá)載體的構(gòu)建
　　 目的：將大鼠Inhibinα基因的啟動子區(qū)分段克隆后分別構(gòu)建真核表達(dá)載

3、體，為進(jìn)一步篩選出其核心啟動子做好準(zhǔn)備。
　　 方法：利用已有文獻(xiàn)及網(wǎng)絡(luò)資源進(jìn)行Inhibinα啟動子區(qū)的預(yù)測及生物信息學(xué)分析，用基因重組技術(shù)將預(yù)測的啟動子區(qū)分段克隆到真核表達(dá)載體pEGFP-N1中，并對其測序驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：成功克隆了大鼠Inhibinα基因的啟動子區(qū)的395bp、606bp、775bp大小的片段，并分別構(gòu)建了這三種片段的真核表達(dá)載體。
　　 結(jié)論：對預(yù)測的大鼠Inhibinα基因的啟動子區(qū)