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1、目的:通過(guò)建立復(fù)合型憤怒老化大鼠模型,從行為學(xué)、生物化學(xué)、形態(tài)學(xué)等多角度觀察憤怒情志對(duì)D-半乳糖大鼠的影響,探討憤怒情志加速衰老的作用機(jī)理,為預(yù)防過(guò)速老化提供病因?qū)W依據(jù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)支持。并進(jìn)一步為肝主疏泄、調(diào)暢情志及七情內(nèi)傷的中醫(yī)理論提供新的科學(xué)內(nèi)涵和認(rèn)識(shí)。 方法:選用清潔級(jí)3月齡Wistar雄性大鼠72只,體重270±10g,隨機(jī)分成正常對(duì)照組、D-gal組、憤怒組、憤怒D-gal組以及攻擊鼠。對(duì)D-gal組和憤怒D-gal組,
2、行頸后部皮下注射大劑量D-gal連續(xù)6周,復(fù)制亞急性衰老及腦老化動(dòng)物模型:自第3周始,憤怒組和憤怒D-gal組采用夾尾間接刺激法制各憤怒情緒應(yīng)激模型。實(shí)驗(yàn)第37天始用Morris水迷宮法觀察各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的變化,歷時(shí)6天,第42天用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)法對(duì)各組大鼠進(jìn)行行為學(xué)觀察,第43天取材并檢測(cè)以下指標(biāo):①抗氧化能力:血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、心肝組織丙二醛(methylenedioxyamph
3、etamine,MDA)、脂褐素(liposcin,LPF);②激素:血清皮質(zhì)酮(corticostrone,CORT):③神經(jīng)介質(zhì):血清去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)、五羥色胺(5-hydroxytryp-tamine,5-HT):④大鼠脾臟指數(shù);⑤光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠大腦皮質(zhì)、海馬組織形態(tài)學(xué)的變化。 結(jié)果: 1.復(fù)合型“憤怒老化大鼠模型”制備成功。 2.曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中,憤怒組和憤怒D-gal組
4、較正常對(duì)照組垂直得分及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)總分均顯著增加,憤怒D-gal組較D-gal組水平得分及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)總分均顯著增加。 3.憤怒組和憤怒D-gal組較正常對(duì)照組心肝MDA、LPF含量顯著提高,血清SOD含量顯著降低。憤怒D-gal組較D-gal組心肝MDA、LPF含量顯著提高,血清SOD含量顯著降低。 4.憤怒組和憤怒D-gal組較正常對(duì)照組血清CORT、NE含量顯著提高,血清5-HT含量顯著降低。 5.憤怒組、D-ga
5、l組和憤怒D-gal組較正常對(duì)照組脾臟指數(shù)均顯著下降,憤怒D-gal組較D-gal組脾臟指數(shù)顯著下降。 6.D-gal組、憤怒組及憤怒D-gal組較正常對(duì)照組學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降,憤怒D-gal組較D-gal組學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降。 7.憤怒組和憤怒D-gal組大腦皮質(zhì)和海馬部位的結(jié)構(gòu)變化與老齡動(dòng)物一致。 結(jié)論: 1.憤怒長(zhǎng)期積累可以導(dǎo)致大鼠機(jī)體出現(xiàn)擬老化改變。 2.憤怒長(zhǎng)期積累可以加重D-半乳糖
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