抗PD-L1單抗聯(lián)合CTL對肺癌免疫治療的實驗研究.pdf

1、蘇州大學碩士學位論文抗PD-L1單抗聯(lián)合CTL對肺癌免疫治療的實驗研究姓名：包紅菊申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學（呼吸病學）指導教師：黃建安20100401中文摘要 抗P D ．L I 單抗聯(lián)合C T L 對肺癌免疫治療的實驗研究基因的H 4 6 0 ／m o c k 細胞相比，H 4 6 0 ／P D ．L 1 細胞能抑制抗人C D 3 單抗( m A b ) 束U 激的T細胞增殖【( 0 ．7 0 3 4 - 0 ．0 1 4 )

2、V S ( O ．6 6 5 士0 ．0 1 4 ) ，P < 0 ．0 1 ] ；I F N 吖的分泌水平顯著下降[ ( 4 0 3 ．9 4 - 4 ．7 ) p g ／m lV S ( 1 1 8 ．74 - 7 ．4 ) p g ／m l ，P < O ．0 1 ] 。加入抗P D - L l 單抗后能阻斷P D ．L 1 信號對C D 3 單抗刺激的T 細胞增殖的負性作用【( 0 ．6 6 5 4 - 0 ．0 1

3、 4 ) V S( 0 ．6 9 0 4 - 0 ．0 1 7 ) ，P < 0 ．0 5 ] ，I F N 吖的分泌水平明顯上調(diào)[ ( 1 1 8 ．7 4 - 7 ．4 ) p g ／m l V S ( 4 0 1 ．0 4 -1 0 ．7 ) p g ／m l ，P < 0 ．0 1 ] 。結論：建立了穩(wěn)定轉染P D ．L 1 基因的肺癌H 4 6 0 細胞株，該細胞株在體外對抗人C D 3 單抗刺激的T 細胞增殖和細

4、胞因子的分泌具有抑制作用，抗P D ．L 1 單抗能阻斷此負性作用。關鍵詞：P D ．L 1 ；T 細胞；H 4 6 0 細胞；肺癌第二部分 抗P D ．L 1 單抗聯(lián)合C T L 對裸鼠H 4 6 0 ／P D ．L 1 肺癌移植瘤治療作用的研究目的：建立人肺癌細胞株H 4 6 0 ／P D ．L 1 、H 4 6 0 ／m o c k 荷瘤裸鼠模型，抗P D ．L 1 單抗及過繼回輸肺癌抗原特異性C T L ，評價其體內(nèi)抗腫瘤效應。

5、方法：常規(guī)方法從健康人外周血單個核細胞中誘導樹突狀細胞( d e n d r i t i c c e l l s ，D C s ) ，采用凋亡腫瘤細胞負載D C s ，并利用激發(fā)型C D 4 0 單克隆抗體( C D 4 0 m A b ) 誘導D C s 成熟；成熟D C s 與自體T 細胞共育，獲得C T L ，流式細胞儀檢測C T L 細胞表型的變化；建立人肺癌細胞株H 4 6 0 ／P D ．L 1 、H 4 6 0 ／m o

6、c k 荷瘤裸鼠模型，應用抗P D ．L 1 單抗聯(lián)合C T L 進行免疫治療，評價其在體內(nèi)的抗腫瘤效應。結果：凋亡腫瘤細胞負載聯(lián)合C D 4 0 單抗激發(fā)上調(diào)D C s 表面C D l a 、C D 8 0 、C D 8 3 、H L A —D R的表達；成熟D C s 和自體的T 細胞共育活化后C D 8 + T 細胞比例明顯上調(diào)；體內(nèi)實驗表明，生理鹽水( N S ) 組，H 4 6 0 ／P D - L 1 組腫瘤體積較H 4 6

7、 0 ／m o c k 組腫瘤體積明顯增大，差異有統(tǒng)計學意義( 尸< O ．0 5 ) ；H 4 6 0 ／P D - L 1 組裸鼠出現(xiàn)右下側皮膚轉移和肝臟彌漫性轉移，在5 周內(nèi)全部死亡，生存時間明顯少于H 4 6 0 ／m o c k 組裸鼠( P < 0 ．0 1 ) ；C T L 可有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生長，對H 4 6 0 ／m o c k 組較H 4 6 0 ／P D - L 1 組抑瘤作用強，差異有統(tǒng)計學意