激發(fā)型CD40單抗聯(lián)合CTL對(duì)人源化SCID小鼠B細(xì)胞淋巴瘤免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本課題的研究目的是建立人源化SCID小鼠人B細(xì)胞淋巴瘤模型，在此基礎(chǔ)上探討激發(fā)型抗人CD40單克隆抗體5c11聯(lián)合CTL對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤的免疫治療作用。 SCID小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)抑制骨髓造血，連續(xù)4天后，通過腹腔注射移植人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)。移植4周、8周、12周后分別收集外周血、脾臟、肝臟。熒光顯微鏡下觀察SCID小鼠外周血中人CD3+、CD19+細(xì)胞；流式細(xì)胞儀測(cè)定小鼠全血中人CD3+、CD19+細(xì)胞百

2、分率；免疫組織化學(xué)分析SCID小鼠肝臟和脾臟中人CD3+、CD19+細(xì)胞；ELISA檢測(cè)SCID小鼠血清中人免疫球蛋白IgG含量。結(jié)果顯示：(1)SCID小鼠移植人外周血單個(gè)核細(xì)胞4周、8周、12周后在小鼠外周血中通過熒光顯微鏡下可觀察到人CD3+、CD19+細(xì)胞，4周后流式細(xì)胞儀測(cè)得小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞中人CD19+、CD3+細(xì)胞百分率分別為10.6％、31.7％；(2)免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示在小鼠脾臟中存在人CD3+、CD19+細(xì)胞；

3、(3)移植人外周血單個(gè)核細(xì)胞4周、8周、12周后ELISA測(cè)得小鼠血清中人免疫球蛋白IgG的含量分別為390μg/ml、1100μg/ml、1040μg/ml。 對(duì)低腫瘤負(fù)荷小鼠治療結(jié)果顯示，經(jīng)5c11、CTL或5c11聯(lián)合CTL治療后各組小鼠腫瘤形成時(shí)間明顯晚于對(duì)照組，生存期顯著延長，CTL與聯(lián)合治療分別取得了33％和67％的完全緩解率。對(duì)高腫瘤負(fù)荷小鼠治療結(jié)果顯示，雖然未能使得已形成的實(shí)體瘤消退，也未取得完全緩解率，但是各治