γ-IFN誘導NB細胞分化及TrkA表達的實驗研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文γIFN誘導NB細胞分化及TrkA表達的實驗研究姓名：張繼紅申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：張錦華2000.4.1三者之間的關(guān)系。這～研究目的在于揭示NB細胞分化的分子生物學機理；且探索7IFN誘導KCNR細胞系分化的最佳作用時間及應用劑量。這一課題研究的成功可為NB細胞的誘導分化及臨床治療提供理論依據(jù)。實驗方法一、細胞培養(yǎng)：人NBSMS—KCNR細胞系經(jīng)復蘇后，常規(guī)培養(yǎng)，每3天換液一次。細胞覆蓋瓶底面積

2、80％以上時，用吸管吹開分瓶傳代。二、實驗分組：將7IFN用細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液配成三種不同濃度(500]U／ml、1000IU／ml、2000IU／m1)的培養(yǎng)液，4‘C保存。使用時空白對照組(不加藥組)直接換入正常培養(yǎng)液；甲、乙、丙實驗組分別換入含7一IFN500IU／ml、1000IU／ml、2000IU／ml的培養(yǎng)液。三、觀察指標：、1活細胞計數(shù)。；取指數(shù)生長期細胞，接種至24孔培養(yǎng)板，實驗組培養(yǎng)液換成丙組培養(yǎng)液，分別于O時，1

3、天，4厭，7天，10天計數(shù)活細胞。采用02％，臺盼藍作拒染試驗判定細胞活性，不著色細胞為活細胞，細胞計數(shù)器計數(shù)?！巍吻?細胞形態(tài)學改璺&用柞分北研究的細胞，接種在100ml培養(yǎng)瓶中。甲、乙、雨實驗組及對照組同時接種。處理封爵，分別于，O時，1天，4天。7天一。天在相差顯微鏡下觀察細胞生長及分化情況。根據(jù)Sandquist法細臌形態(tài)分化標準為存一個或一個以上的軸突長度延伸至胞體直徑_；：|；倍略暈。一37IFN對TrkA口R：卜擤表達的影