α-鵝膏毒肽致小鼠肝細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究α-鵝膏毒肽(α-amanitin AMA)是否對(duì)正常小鼠肝細(xì)胞存在致凋亡作用以及是否存在劑量和時(shí)間效應(yīng)關(guān)系,初步探討α-鵝膏毒肽致肝損害的機(jī)理.方法:4~6周齡健康雄性昆明小白鼠隨機(jī)抽樣分組,共2組:空白對(duì)照組(腹腔注射生理鹽水)、實(shí)驗(yàn)組(腹腔注射AMA);實(shí)驗(yàn)組①根據(jù)注射AMA劑量不同分為3個(gè)劑量亞組:0.8mg/kg亞組、1.2mg/kg亞組、2.0mg/kg亞組,于注射后24小時(shí)觀察;②AMA(2.0mg/kg)組根據(jù)

2、注射后觀察時(shí)間點(diǎn)不同分為3個(gè)時(shí)間亞組:16小時(shí)亞組、24小時(shí)亞組、36小時(shí)亞組.空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的各亞組中每組5只小鼠,各組小鼠經(jīng)上述處理后分批處死,取肝臟組織進(jìn)行檢測(cè):肝組織切片HE染色光學(xué)顯微鏡和鈾鉛雙重染色透射電鏡觀察肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;肝組織勻漿提取DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè);末端脫氧核糖轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP生物素末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)小鼠肝細(xì)胞凋亡的數(shù)量和凋亡指數(shù)(apoptotic index AI),采用SPSS11.