人絨癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的體內(nèi)鑒定及其化療耐藥特性的初步研究.pdf

1、[目的]用無(wú)血清懸浮培養(yǎng)法從人絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞系中分離培養(yǎng)絨毛膜癌干細(xì)胞樣細(xì)胞，對(duì)其進(jìn)行體內(nèi)鑒定，并對(duì)其進(jìn)行化療藥物敏感性的初步研究。
　　[方法]
　　(1)無(wú)血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)富集法分離培養(yǎng)JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞;
　　(2)裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)觀察JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞及JEG-3親本細(xì)胞兩組細(xì)胞的體內(nèi)成瘤能力;
　　(3) Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)觀察兩組細(xì)胞的侵襲能力;
　　(4) Rea

2、l-time PCR檢測(cè)兩組細(xì)胞中OCT-4、NANOG的表達(dá)水平;
　　(5) MTT法觀察兩組細(xì)胞在不同濃度下對(duì)依托泊苷、氟尿嘧啶和甲氨蝶呤敏感性的變化。
　　[結(jié)果]
　　(1) JEG-3可在SFM中存活、增殖，形成懸浮生長(zhǎng)具有自我更新能力的腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞，并可連續(xù)傳代;
　　(2) JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞較JEG-3親本細(xì)胞具有更高致瘤性;
　　(3) JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞透過(guò)膜的細(xì)胞較JEG

3、-3親本細(xì)胞多，JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞較JEG-3親本細(xì)胞具有更強(qiáng)的侵襲能力（P值=0.006，P值＜0.05）;
　　(4)人絨癌JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞OCT-4、NANOG mRNA的表達(dá)均高于JEG-3親本細(xì)胞，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　(5)在不同濃度的化療藥物作用下，人絨癌JEG-3干細(xì)胞樣細(xì)胞比JEG-3細(xì)胞存活率更高，更具有耐藥性，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]