人胎兒肺上皮細(xì)胞的發(fā)育分化及其干細(xì)胞的初步鑒定.pdf

1、因此該研究擬通過觀察人胎兒肺發(fā)育過程中上皮細(xì)胞發(fā)育分化的形態(tài)特征和特異性蛋白的表達(dá),進一步闡明肺上皮細(xì)胞發(fā)育分化的規(guī)律及其調(diào)節(jié)因素,在形態(tài)和功能上對發(fā)育過程中的肺上皮干細(xì)胞進行鑒定,初步明確可作為鑒定肺干細(xì)胞的標(biāo)志物及方法,同時闡明其存在的壁龕和分布特征,為后續(xù)的研究工作打下基礎(chǔ).結(jié)論一,胎肺發(fā)育19周時,在形態(tài)上即可辨認(rèn)AECⅠ、AECⅡ和氣血屏障結(jié)構(gòu),說明此時AECⅠ和AECⅡ開始分化,是胎肺具有換氣功能的開始.同時,對胎兒肺上皮干

2、細(xì)胞進行分離培養(yǎng)時,應(yīng)選擇19周前的胎肺,以便獲取較多的干細(xì)胞.二,兩種肺泡上皮細(xì)胞在胎肺發(fā)育過程中幾乎同時出現(xiàn),我們沒有發(fā)現(xiàn)向AECⅠ轉(zhuǎn)化中的AECⅡ,提示它們可能來源于同一種祖細(xì)胞或干細(xì)胞,即被覆于終末細(xì)支氣管和原始肺泡的內(nèi)胚層來源的上皮細(xì)胞.三,TTF-1參與支氣管樹形態(tài)發(fā)生和肺泡的發(fā)育成熟,并調(diào)控AECⅡ及肺泡前體細(xì)胞SP-A和SP-B的分泌.在胎肺發(fā)育的過程中,AECⅡ雖然具備了分泌SP的能力,但大多以儲存狀態(tài)為主,或稱為待分

3、泌狀態(tài).胎兒出生以后AECⅡ受到肺泡充氣、牽拉等動力學(xué)因素的刺激,可促使其快速分泌SP.四,隨著未分化的肺上皮干細(xì)胞的分化成熟伴隨著TTF-1表達(dá)的消失,說明從進化上來講,成熟的肺上皮細(xì)胞均來自同一肺上皮的多能干細(xì)胞,而AECⅡ和clara細(xì)胞中的部分細(xì)胞保留了某些未分化細(xì)胞的特征,提示在AECⅡ和clara細(xì)胞中可能存在可充當(dāng)成體干細(xì)胞的細(xì)胞亞群.五,在胎肺發(fā)育中hTERT的持續(xù)表達(dá)是肺干細(xì)胞或祖細(xì)胞維系其未分化狀態(tài)和自我更新能力的重

4、要標(biāo)志,對保證支氣管上皮和肺泡上皮細(xì)胞持續(xù)正常發(fā)育分化和再生,維持上皮組織的完整性起著重要的作用.利用hTERT的反應(yīng)程度來鑒定肺上皮干細(xì)胞有較高的意義.六,CK-19作為上皮干細(xì)胞的標(biāo)志物,在胎肺發(fā)育晚期中較多的表達(dá)于TAC,因此在鑒定肺上皮干細(xì)胞的作用上特異性較低,但有助于鑒別上皮源性和間充質(zhì)來源的干細(xì)胞.七,nestin可能是一種特征性的蛋白在未分化的細(xì)胞中表達(dá),是鑒定干細(xì)胞的較敏感標(biāo)志物之一,在肺上皮細(xì)胞中nestin陽性細(xì)胞代