P16基因、人乳頭瘤病毒與外陰癌變的關系.pdf

1、P16基因是一個多腫瘤抑制基因，是第一個被分離和克隆的抑癌基因。在多種人類腫瘤中，均發(fā)現其缺失和突變。它參與細胞周期的調控，可能是細胞生長、分化調控的中心環(huán)節(jié)。人乳頭瘤病毒(HPV)是目前公認的病毒癌基因，其表達的原癌蛋白能導致上皮細胞永生化，使細胞生長、增殖失控，細胞凋亡異常。對乳腺癌、食管癌及口腔鱗癌的研究中發(fā)現，HPV有非常高的陽性表達率。尤其在宮頸癌的研究中，其表達率高達99％。外陰惡性腫瘤約占女性全身惡性腫瘤的1％，其發(fā)病率近

2、年來有上升趨勢。但其病因目前尚不清楚。本研究采用PCR的方法檢測外陰正常皮膚、VIN及外陰癌中的P16基因和HPV16 DNA，以探討其間關系。 材料和方法: 1、材料與試劑：外陰癌標本37例，VINⅢ10例，正常外陰皮膚組織10例，均來自中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦科手術切除，經病理證實，福爾馬林固定石蠟包埋的組織。二甲苯、無水乙醇、DNA提取試劑盒和PCR擴增引物(購自上海生工試劑公司)，Taq酶、DNTP、DEPC處

3、理雙蒸水和瓊脂糖(購自大連寶生物試劑公司)。 2、根據試劑盒說明分別提取各標本DNA，進行P16基因、HPVl6 DNA及β—actin PCR擴增，產物通過含EB的2％瓊脂糖凝膠電泳檢測。 結果: 1、P16基因在正常外陰皮膚組織中的檢出率為100％，在VINⅢ中為50％，在外陰鱗癌中為23．08％，在基底細胞癌和疣狀癌無檢出。 2、HPV16 DNA在正常外陰皮膚組織中的檢出率為0，在ViNⅢ中為50

4、％，在基底細胞癌中為80％，疣狀癌中為66.67％，在VSCC中無檢出。 3、P16基因在I-Ⅲ期VSCC中為31.25％，Ⅲ-Ⅳ期中為12.5％；在高分化VSCC中的檢出率為2596，在中分化VSCC中為28.57％，在低分化VSCC中無檢出；在無淋巴結轉移中為31.2596，有淋巴結轉移中為10％；大于50歲患者中為30％，小于50歲中為18.75％。 4、在hPV16 DNA陽性的外陰基底細胞癌和疣狀癌病例中，P1