宮頸上皮內(nèi)瘤變與人乳頭瘤病毒感染及P16、P53、Ki67蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、宮頸癌是世界范圍內(nèi)女性常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率僅次于乳腺癌,居女性惡性腫瘤第二位,而在發(fā)展中國家,宮頸癌是女性死亡率最高的癌癥。近年來,隨著各類宮頸脫落細(xì)胞學(xué)技術(shù)的應(yīng)用和推廣,宮頸癌的發(fā)病率有所降低,但宮頸上皮內(nèi)瘤變(CervicalIntraepithelialNeoplasia,CIN)的發(fā)病率也隨之上升。宮頸上皮內(nèi)瘤變組織學(xué)分級對臨床治療有重要意義,病理診斷為CINⅡ-Ⅲ級的患者將會得到更積極的治療。盡管世界衛(wèi)生組織(WHO)對

2、CIN的組織學(xué)特征有明確描述,但有些病例,單獨(dú)依靠形態(tài)學(xué)本身,宮頸上皮鱗化伴增生與CINⅠ級及CINⅠ級與CINⅡ-Ⅲ級間的鑒別常有一定困難,并常使病理醫(yī)生自身以及各病理醫(yī)生之間對同一張病理切片產(chǎn)生不同的意見。所以,在宮頸活檢組織標(biāo)本中,為了更準(zhǔn)確的診斷CIN及分級,除了組織形態(tài)學(xué)以外,還需找到一些指標(biāo)輔助診斷。人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)在宮頸癌的發(fā)生過程中起著重要的作用,在90％的宮頸浸潤癌中都檢測

3、到高危HPV的存在。最常見的HPV高危亞型包括16和18亞型,大約占高危亞型的70%;而低危型HPV最常見的為6和11亞型,大約占低危亞型的90%,能夠引起生殖道濕疣和宮頸低級別上皮內(nèi)病變。細(xì)胞周期失控和異常增殖將導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。p16是細(xì)胞周期依賴性激酶(CDK)的一種抑制因子,正常功能是作為一種腫瘤抑制因子。盡管在一些惡性腫瘤中,p16表達(dá)水平下降,但是在絕大多數(shù)高危HPV引起的高級別宮頸上皮內(nèi)病變和宮頸癌中,p16表達(dá)確升高。作為

4、腫瘤抑制因子,p53是控制細(xì)胞增殖的主要因子之一。當(dāng)有DNA損害時,p53能夠阻滯細(xì)胞周期或是直接誘導(dǎo)受損害的細(xì)胞進(jìn)入凋亡途徑。Ki67是在增殖細(xì)胞中表達(dá)的一種核抗原,能在除G0期以外的所有細(xì)胞周期中表達(dá)。本次研究是探討HPV高危型(16/18型)及低危型(6/11型)感染及P16、P53、Ki67蛋白表達(dá)在CIN診斷和分級中的意義。本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測191例宮頸各類病變中P16、P53及Ki67蛋白表達(dá),并通過聚合酶鏈反應(yīng)

5、(PCR)檢測其中104例HPV16/18型及6/11型DNA。P16定位于細(xì)胞核和/或細(xì)胞質(zhì),依據(jù)P16免疫組化染色陽性細(xì)胞分布的形狀特點(diǎn)分為點(diǎn)狀(>10%上皮陽性細(xì)胞呈散在分布)和帶狀(>90%上皮陽性細(xì)胞呈彌漫分布);P53定位于細(xì)胞核,陽性細(xì)胞數(shù)>5%,記錄為陽性;Ki67定位于細(xì)胞核,每例標(biāo)本記錄增殖指數(shù)(proliferationindex,PI)及陽性細(xì)胞在鱗狀上皮中的位置(上皮下1/3,下2/3,或上皮全層)。研究結(jié)果顯

6、示在191例標(biāo)本中,P16蛋白表達(dá)率為73.3%,其中的75.0%呈帶狀,25.0%呈點(diǎn)狀。CINⅠ級組P16蛋白表達(dá)率(78.8%,26/33)較鱗化伴增生組(33.4%,13/39)顯著增加(p<0.0001);GINⅡ-Ⅲ級組P16蛋白表達(dá)率(96.1%,74/77)較CINⅠ級組明顯增加(p=0.004);宮頸癌組P16蛋白表達(dá)率(94.4%,17/18)與CINⅡ-Ⅲ級組無明顯差異(p=0.575)。在P16表達(dá)類型方面,鱗化

7、伴增生組P16蛋白表達(dá)以散在點(diǎn)狀或陰性為主(92.3%,36/39);宮頸濕疣組P16蛋白表達(dá)亦以散在點(diǎn)狀或陰性為主(91.7%,22/24);CINⅠ級組P16蛋白表達(dá)散在點(diǎn)狀和連續(xù)帶狀率相同均為39.4%(13/33);CINⅡ-Ⅲ級組與宮頸癌組P16蛋白表達(dá)主要為連續(xù)帶狀(91.6%,87/95);按照鱗化伴增生→CINⅠ級→CINⅡ-Ⅲ級→宮頸癌的順序,P16蛋白表達(dá)類型逐漸從散在點(diǎn)狀轉(zhuǎn)變?yōu)檫B續(xù)帶狀,且p16蛋白表達(dá)類型的差異在

8、各組間具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.0001)。191例標(biāo)本中P53蛋白的表達(dá)率為45.5%(87/191),其中在宮頸濕疣組的P53蛋白表達(dá)率最高,為75.0%(18/24),與宮頸上皮鱗化伴增生組、CINⅠ級組及CINⅡ-Ⅲ級組均有顯著性差異(p<0.05),但與宮頸癌組無顯著性差異(X2=0.3500,p=0.554)。191例宮頸各組病變病例Ki67增殖指數(shù)為0.1874±0.1879,按照鱗化伴增生→CINⅠ級→CINⅡ-Ⅲ級→宮頸

9、癌的順序,Ki67增殖指數(shù)逐漸升高。其中CINⅠ級組Ki67增殖指數(shù)(0.1345±0.1034)較鱗化伴增生組(0.0594±0.0415)明顯增高(p<0.0001),CINⅡ-Ⅲ級組Ki67增殖指數(shù)(0.2375±0.2020)較CINⅠ級組明顯增高(p=0.0036),宮頸癌組Ki67增殖指數(shù)(0.3361±0.2306)與CINⅡ-Ⅲ級組無明顯差異(p=0.0853)。在Ki67陽性細(xì)胞在上皮中的位置方面,在CINⅠ級組病例,

10、Ki67表達(dá)陽性細(xì)胞多局限于上皮的下1/3,而在CINⅡ-Ⅲ級組和宮頸癌組病例,Ki67陽性細(xì)胞則至上皮的上1/2甚至上皮全層,宮頸各組病變Ki67陽性細(xì)胞在鱗狀上皮中的位置分布(上皮下1/3,下2/3,上皮全層)差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(X2=87.8387,p<0.0001)。在104例HPVDNA檢測病例中,HPV16/18型DNA檢出率為48.1%(50/104)。CINⅠ級組HPV16/18型檢出率較鱗化伴增生組明顯增加(p=0.

11、018);CINⅡ-Ⅲ級組HPV16/18型檢出率同CINⅠ級組無顯著性差異(p=0.986)。104例標(biāo)本中,HPV6/11型DNA檢出率為8.7%(9/104),其中宮頸濕疣組檢出率80.0%(8/10)明顯高于其它組(p<0.05)。在HPV感染與P16、P53及Ki67蛋白表達(dá)的相關(guān)性方面,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析表明P16蛋白表達(dá)與HPV16/18感染顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=1.0000,p<0.0001),與HPV6/11感染相關(guān)性無統(tǒng)計

12、學(xué)意義(相關(guān)系數(shù)r=0.7906,p=0.1114):P53蛋白的表達(dá)在HPV16/18感染病例與非感染病例無明顯差異(X2=0.2189,p=0.640),而在HPV6/11感染病例與非感染病例存在明顯差異(X2=4.1640,p=0.041);Ki67蛋白表達(dá)與HPV16/18感染明顯正相關(guān)(r=1.0000,p<0.0001)。我們的研究表明P16、Ki67可以作為宮頸上皮鱗化伴增生與CINⅠ級以及CINⅠ級與CINⅡ-Ⅲ級之間鑒