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1、本研究的目的是制備大鼠淡水淹溺模型,探討腦組織中細(xì)胞因子TNF-α、NF-κB的表達(dá)狀況與淹溺應(yīng)激引起腦損傷之間的關(guān)系,為臨床救治溺水患者過(guò)程中及早應(yīng)用細(xì)胞因子阻斷劑以防治和減輕腦部損傷,降低神經(jīng)后遺癥的發(fā)生提供理論依據(jù)。 方法: 1.分組:選擇70只winstar大鼠,制備淡水淹溺模型。動(dòng)物隨機(jī)分為三組:Ⅰ組(正常對(duì)照組,10只大鼠),Ⅱ組(溺水致死組,10只大鼠)和Ⅲ組(溺水非致死組,50只大鼠),其中Ⅲ組又于溺水后
2、存活3h、6h、12h、24h、40h各時(shí)問(wèn)點(diǎn),每次各10只,均按實(shí)驗(yàn)要求檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)后處死動(dòng)物,取腦組織制備病理標(biāo)本。 2.腦組織病理形態(tài)學(xué)改變觀察:HE染色法制片,光學(xué)顯微鏡下觀察。3.應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)各組大鼠腦組織中TNF-α、NF-κB的表達(dá)。 結(jié)果: 1.病理形態(tài)學(xué)改變Ⅰ組:腦組織結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)水腫、出血、壞死病灶;Ⅱ組:腦實(shí)質(zhì)疏松,小血管周隙增寬,部分神經(jīng)細(xì)胞體積增大變性;Ⅲ組溺水后存活3h、6h、1
3、2h、24h、40h腦損傷程度逐漸加重,其中24h腦水腫最重,40h組個(gè)別腦實(shí)質(zhì)小灶性液化性壞死。 2.Ⅱ組動(dòng)物腦指數(shù)明顯增加與Ⅰ組動(dòng)物腦指數(shù)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);Ⅲ組3、12h者腦指數(shù)顯著小于Ⅱ組動(dòng)物腦指數(shù)(P值均<0.05);存活24、40h者腦指數(shù)與Ⅱ組動(dòng)物腦指數(shù)相比有所降低,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。3.TNF-α在Ⅰ組和Ⅱ組中有弱表達(dá);Ⅲ組中溺水后存活3h、6h、12h、24h、40h者TNF-α的表
4、達(dá)先逐漸增加,12h時(shí)達(dá)高峰,之后TNF-α的表達(dá)逐漸下降。其中12h者與Ⅰ組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4.NF-κB在Ⅰ組中僅有弱表達(dá);在Ⅱ組中的表達(dá)略高于Ⅰ組;Ⅲ組中存活3h、6h、12h、24h、40h者NF-κB的表達(dá)先逐漸增加,6h至12h達(dá)高峰,之后又逐漸下降。其中6h、12h者與Ⅰ組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 5.TNF-α、NF-κB在溺水后大鼠腦組織中的表達(dá)存在正相關(guān)性。 結(jié)論
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