JAK2-STAT3信號通路介導(dǎo)TTX心肌保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：探討JAK2/STAT3信號通路在河豚毒素(tetrodotoxin，TTX)心臟停搏液保護缺血再灌注心肌中的作用及其機制。 方法：取Wistar大鼠24只，隨機分成對照組、TTX組和TTX+AG490組，每組8只。對照組：開胸取左心室肌作為缺血前對照。TTX組：建立離體心臟Langendorff-Neely灌注模型，預(yù)灌注K-H緩沖液30min后，灌注4℃ TTX心臟停搏液，停搏心臟并低溫維持60min，復(fù)灌K-H緩沖液

2、60min后，取左心室肌備用。TTX+AG490組：操作同TTX組，但預(yù)灌和復(fù)灌時均在K-H緩沖液中加入JAK2抑制劑AG490(5μmol/L)。采用免疫組化法測定心肌組織中p-STAT3，Bcl-2和HSP70表達量(protem expression index，PEI)；Western blot測定心肌組織中p-STAT3含量；比色法測定心肌勻漿液中SOD活性和MDA含量；TU-NEL檢測心肌細胞凋亡指數(shù)(apoptosis i

3、ndex，AI)。 結(jié)果：免疫組化法測定的p-STAT3 PEI在對照組、TTX組和TTX+AG490組分別是2.65±0.15％、18.19±1.68％和6.91±1.03％，提示經(jīng)TTX處理后的心肌組織中p-STAT3蛋白表達較缺血前明顯增加(P<0.05)，而加用AG490處理后的心肌組織中p-STAT3蛋白表達較TTX組明顯下降(P<0.05)。Westem blot測定心肌組織中p-STAT3含量，結(jié)果與免疫組化一致。

4、 Bcl-2 PEI在對照組、TTX組和TTX+AG490組分別是2.96±0.69％、23.40±1.19％和11.47±1.15％，提示經(jīng)TTX處理后的心肌組織中Bcl-2蛋白表達較缺血前明顯增加(P<0.05)，而加用AG490處理后的心肌組織中Bcl-2蛋白表達較TTX組明顯下降(P<0.05)。 HSP70 PEI分別是對照組2.52±0.58％、TTX組22.63±1.15％和TTX+AG490組14.40±

5、1.20％，提示經(jīng)TTX處理后的心肌組織中HSP70蛋白表達較缺血前明顯增加(P<0.05)，而加用AG490處理后的心肌組織中HSP70蛋白表達較TTX組明顯下降(P<0.05)。 Bcl-2蛋白表達與p-STAT3蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.743，P<0.05)，HSP70蛋白表達與p-STAT3蛋白表達亦呈正相關(guān)(r=0.826，P<0.05)。 心肌勻漿液中SOD活性(U/mgprot)在對照組、TTX組和TTX

6、+AG490組分別是6.55±0.81、20.56±1.16和13.55±1.17，MDA含量(nmol/mgprot)分別是3.13±0.31、8.55±0.53和15.52±1.04；提示經(jīng)TTX處理后的心肌勻漿液中SOD活性較缺血前顯著升高(P<0.05)，MDA含量亦顯著增加(P<0.05)；而加用AG490處理后的心肌勻漿液中SOD活性較TTX組顯著降低(P<0.05)，MDA含量卻明顯增加(P<0.05)。 對照組、

7、TTX組和TTX+AG490組的心肌細胞AI分別是1.31±0.11％、6.92±1.11％和16.21±1.40％，提示經(jīng)TTX處理后的心肌細胞AI較缺血前明顯增加(P<0.05)，而加用AG490處理后的心肌細胞AI較TTX組明顯增加(P<0.05)。 結(jié)論：JAK2/STAT3信號通路介導(dǎo)了TTX心臟停搏液對缺血再灌注心肌的保護作用。其可能的機制是：TTX通過激活JAK2/STAT3信號通路，活化STAT3，上調(diào)抗凋亡蛋白