JAK2-STAT3信號通路介導粒細胞集落刺激因子影響冠狀動脈微栓塞后心肌細胞凋亡的實驗研究.pdf

1、微栓塞是冠狀動脈無復流的主要原因，是急性冠脈綜合征(ACS)及經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)中十分常見且重要的臨床病理過程[1]，減少冠狀動脈微栓塞(CME)的發(fā)生以及改善CME引起的心肌細胞損傷具有重要的臨床意義。為此，我們利用大鼠自體微栓塞模型，通過CME后心肌細胞凋亡調(diào)控基因、凋亡執(zhí)行蛋白表達的改變以及血流動力學檢測，探討(1)CME對心肌細胞凋亡及左心室功能的影響。(2)粒細胞集落刺激因子(G-CSF)對冠脈微栓塞心肌細胞凋亡的

2、影響及其細胞內(nèi)信號傳導機制。 一、冠狀動脈微栓塞對心肌細胞凋亡及左心室功能的影響目的：探討冠脈微栓塞對大鼠心肌細胞凋亡及左心室功能的影響。方法：采用清潔級健康雄性SD大鼠56只，體重280～320g。隨機分為假手術組(Sham組n=24)和微栓塞組(CME組n=32)；根據(jù)不同觀察時間點再分為術后3d(天)、7d、14d及28d四個亞組，每亞組6-8只。CME組夾閉升主動脈同時自左室腔注入自體微血栓混懸液，Sham組則注入等容量

3、的生理鹽水。采用HE及Masson染色觀察心肌組織病理學改變；Real-time PCR及免疫組化檢測心肌細胞Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L等凋亡調(diào)控基因mRNA及其蛋白的表達；采用Western blot方法檢測Caspase3、Caspase9和裂解PARP蛋白的表達；應用超聲心動圖及有創(chuàng)血液動力學檢測大鼠左心功能的變化。 結(jié)果：(1)HE染色顯示CME術后可見心內(nèi)膜下多中心小灶性心肌缺血、壞死伴白細胞浸潤。Mass

4、on染色顯示CME后心肌微小纖維灶形成，且多分布于心內(nèi)膜區(qū)。(2)與Sham組相比較，CME組術后Bax、Fas及Fas-L mRNA及其蛋白的表達水平明顯增高，Bc1-2/Bax的比值明顯降低(7d：0.18±0.04 vs 2.98±0.49)，術后7d達高峰(P<0.01)。(3)CME組Caspase-3、Caspase-9及裂解PARP蛋白表達明顯高于Sham組，同樣在術后7d達高峰(P<0.01)。(4)CME組凋亡指數(shù)較S