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1、目的:研究重組人纖維連接蛋白C端肝素結(jié)合域多肽(rhFNHC36)對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901體內(nèi)外遷移轉(zhuǎn)移能力的影響,初步探討其可能涉及的機(jī)制。
方法:1、通過結(jié)晶紫法檢測(cè)rhFNHC36對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901粘附能力的影響;2、通過Transwell小室檢測(cè)rhFNHC36對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901遷移侵襲能力的影響;3、通過Westernblot測(cè)定rhFNHC36對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901相關(guān)整合素αV、
2、β1、β3及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白E-cadherin、Vimentin表達(dá)量的影響;4、通過明膠酶譜法測(cè)定rhFNHC36對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901基質(zhì)金屬酶9活性的影響;5、通過熒光素酶標(biāo)記的人胃癌細(xì)胞株 SGC-7901血行轉(zhuǎn)移模型觀察rhFNHC36對(duì)細(xì)胞裸鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)移能力的影響。
結(jié)果:1、rhFNHC36不同濃度組(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的SGC-7901細(xì)胞的基質(zhì)膠粘附率分別為81
3、.04±1.50%、74.77±1.20%、68.62±2.37%,明顯低于對(duì)照組(假定粘附率為100%),差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);rhFNHC36不同濃度組(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的SGC-7901細(xì)胞對(duì)FN粘附率分別為80.63±±5.22%、79.00±2.26%、73.38±2.02%,與對(duì)照組相比(假定粘附率為100%),中、高劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、rh
4、FNHC36不同濃度組(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)的SGC-7901細(xì)胞遷移數(shù)[單位:個(gè)]分別為77±15、65±15、35±6,與對(duì)照組(130±7)相比,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);rhFNHC36各組細(xì)胞侵襲數(shù)分別為24±4、17±4、12±5,與對(duì)照組(48±9)相比,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3、、rhFNHC36不同濃度組(100μg/ml、200μg/ml、400μg/
5、ml)的SGC-7901細(xì)胞的整合素αV的表達(dá)分別為0.54±0.14、0.45±0.16、0.31±0.08,明顯低于對(duì)照組0.94±0.07(P<0.01);且整合素β1的表達(dá)分別為0.38±0.13、0.35±0.11、0.35±0.12,低于對(duì)照組0.79±0.03(P<0.01);而各組的整合素蛋白β3、E-cadherin、Vimentin的表達(dá)均無明顯變化。
4、rhFNHC36不同濃度組(100μg/ml、20
6、0μg/ml、400μg/ml)的SGC-7901細(xì)胞的pro-MMP9表達(dá)活性分別為723±49.42、622±36.12、564±38.19,明顯低于對(duì)照組966±49.78(P<0.01);各組act-MMP9的活性表達(dá),分別為248±23.16、191±23.90、164±22.28,明顯低于對(duì)照組308±38.56(P<0.05)。
5、rhFNHC36組的肝臟腫瘤光子總數(shù)[單位:p/s]為6.41E8±6.45E8
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