中國(guó)漢族人群免疫球蛋白受體同系物家簇基因單核苷酸多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、強(qiáng)直性脊柱炎（Ankylosing Spondylitis，AS）是一種血清學(xué)陰性，主要侵犯中軸骶骼關(guān)節(jié)的慢性炎癥性自身免疫性疾病，其臨床發(fā)病率較高，多見于青壯年男性，且有較高的家族聚集性。該病目前病因尚不明確，其發(fā)病被認(rèn)為與多種因素有關(guān)，是一種十分復(fù)雜的疾病，又稱為多因子疾?。╩ultifactorial disease）。雖然針對(duì)AS的病因和發(fā)病機(jī)制，已經(jīng)提出過(guò)很多學(xué)說(shuō)，包括分子模擬學(xué)說(shuō)、致關(guān)節(jié)炎多肽學(xué)說(shuō)、HLA-B27 分子非折疊

2、蛋白理論假說(shuō)等，但到目前為止，AS發(fā)生的確切原因尚不清楚。國(guó)內(nèi)外大量研究表明，遺傳因素是強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病的主導(dǎo)因素，通過(guò)全基因組掃描發(fā)現(xiàn)，多個(gè)區(qū)域與AS易感性有關(guān)[1,2]。其中以HLA-B27為代表的HLA區(qū)基因與AS的關(guān)聯(lián)性最強(qiáng)，HLA-B27與AS的遺傳易感性研究已經(jīng)經(jīng)歷了30多年，在不同國(guó)家和地區(qū)都得到了證實(shí)，但確切的發(fā)病機(jī)理還不是十分清楚，而且整個(gè)HLA區(qū)域只能解釋AS遺傳易感性的40-50％，因此，非HLA區(qū)基因與AS易感性

3、關(guān)聯(lián)研究將是下一步研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。
　　 本研究旨在通過(guò)較大規(guī)模的強(qiáng)直性脊柱炎的遺傳流行病學(xué)調(diào)查，借助人類基因組計(jì)劃的研究成果，明確中國(guó)漢族人群易感區(qū)域易感基因（免疫球蛋白受體同系物基因）的單核苷酸多態(tài)性及單倍型與AS的遺傳關(guān)聯(lián)性，構(gòu)建中國(guó)人群該易感家簇基因中與AS有關(guān)聯(lián)意義的單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)和單倍型,并初步探討基因和環(huán)境的交互作用。本研究采用經(jīng)典病例對(duì)照設(shè)

4、計(jì)方案，以問(wèn)卷調(diào)查的方式，共收集169例HLA-B27陽(yáng)性患者(107 男性和62女性)和184個(gè)HLA-B27陽(yáng)性健康對(duì)照(112個(gè)男性和72個(gè)女性)的一般流行病學(xué)資料和DNA血樣，選擇免疫球蛋白受體同系物家族基因中的FCRL1（1個(gè)功能SNP）、FCRL3（3個(gè)功能SNP）、FCRL4(1個(gè)功能SNP)、以及FCRL5(4個(gè)功能SNP)四個(gè)基因中的9個(gè)功能SNP（即改變氨基酸序列的非同義突變），通過(guò)PCR擴(kuò)增后，用連接酶檢測(cè)反應(yīng)的方

5、法篩查這些功能SNP位點(diǎn)的基因型及其在中國(guó)人群中的頻率；并構(gòu)建中國(guó)漢族人群中與AS有關(guān)聯(lián)的SNPs和單倍型。用EPIdata 3.0軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，數(shù)據(jù)經(jīng)檢錯(cuò)、整理后分別應(yīng)用社會(huì)科學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件包（SPSS10.01）和經(jīng)典的病例對(duì)照在線分析軟件Shesis（http://analysis.bio-x.cn/myAnalysis.php）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。應(yīng)用非條件多元Logistic回歸方法分析AS可能存在的基因和環(huán)境交互作用。169個(gè)患者

6、來(lái)自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院的門診和住院病人，平均年齡為26.38±6.32歲（其中最小為14歲，最大為78歲）。通過(guò)對(duì)FCRL中的五個(gè)基因中的9個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行篩查，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)FCRL1、FCRL3和FCRL4中的SNPs與AS有遺傳關(guān)聯(lián)性，而FCRL5基因中的2個(gè)SNPs（rs12036228和 rs6427384）與AS存在遺傳上的關(guān)聯(lián)性，進(jìn)一步分析提示rs12036228位點(diǎn)上C等位基因的出現(xiàn)增加AS發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)性，而rs6427

7、384位點(diǎn)上T等位基因的出現(xiàn)增加AS發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)性,在對(duì)上述2個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行單倍型分析后發(fā)現(xiàn)：攜帶有C-C單倍型的個(gè)體對(duì)AS發(fā)病具有保護(hù)性作用，而攜帶有C-T單倍型的個(gè)體則對(duì)AS的發(fā)病具有更高風(fēng)險(xiǎn)性。同時(shí)我們對(duì)中國(guó)漢族人群的HLA-B27及其亞型的結(jié)果進(jìn)行篩查，研究結(jié)果提示在中國(guó)漢族人群中存在四種亞型(B * 2703,B * 2704，B * 2705和B * 2706)，其中病例組中以B*2704和B*2705兩個(gè)亞型較常見，分別占

8、53.8％和34.9％，對(duì)照組中同樣是B*2704和B*2705兩個(gè)亞型較常見，病例組這兩個(gè)亞型的比例高于對(duì)照組，但結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（c2=7.014,P=0.056）；另外對(duì)影響總體背痛程度因素進(jìn)行單因素分析，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)總體背痛程度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素，故沒(méi)有進(jìn)一步進(jìn)行多元分析。通對(duì)BASFI影響因素進(jìn)行多因素分析結(jié)果提示性別、病程、學(xué)歷、飲酒史可能是BASFI影響因素；同時(shí)我們將可能與AS發(fā)病有關(guān)的環(huán)境因素和可能易感SNP位點(diǎn)及交互項(xiàng)

9、進(jìn)行非條件logistic回歸的擬合分析，結(jié)果顯示：在調(diào)整其他自變量的情況下，最后進(jìn)入模型的兩個(gè)變量是有感染史和家庭居住環(huán)境，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)FCRL5基因與上述環(huán)境因素之間存在交互作用。
　　 綜上所述，本研究認(rèn)為在中國(guó)漢族人群中免疫球蛋白受體同系物家族基因（位于1q23-24區(qū)域）可能與強(qiáng)直性脊柱炎的遺傳易感性有關(guān)，特別是FCRL5基因；同時(shí)還受到環(huán)境因素的作用，但本次研究未發(fā)現(xiàn)基因和環(huán)境因素對(duì)AS存在交互作用。至于不同HLA-B