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1、目的:隨著腹膜透析(PD)技術(shù)的不斷成熟,腹透已成為終末期腎衰竭(ESRF)一體化治療的重要組成部分,腹膜結(jié)構(gòu)和生理功能的穩(wěn)定是PD能夠長期有效進(jìn)行的關(guān)鍵.作為腹膜的第一道生理屏障-腹膜間皮細(xì)胞(PMCs)長期暴露在酸性、高滲透壓、高糖的非生理性腹透液中,其結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生顯著變化:如細(xì)胞體積增大,細(xì)胞外基質(zhì)增多,細(xì)胞增殖受抑制,再生修復(fù)障礙,以致發(fā)生腹膜纖維化、腹膜通透性增加,葡萄糖吸收加快,而高糖是造成PMCs損害,超濾下降、喪失的主
2、要原因.葡萄糖無法自由通過細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)進(jìn)入細(xì)胞,需借助細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白來完成,葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白是調(diào)控細(xì)胞內(nèi)糖攝人及糖代謝的第一限速步驟.實驗證實易化擴(kuò)散性葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)是腹膜間皮細(xì)胞表達(dá)的主要轉(zhuǎn)運蛋白,因此,細(xì)胞膜上GLUT1含量變化決定了間皮細(xì)胞對葡萄糖的轉(zhuǎn)運.已知蛋白激酶C(PKC)的激活參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展,體外培養(yǎng)的骨骼肌細(xì)胞在高糖刺激下,葡萄糖轉(zhuǎn)運的增加是通過PKC途徑完成的,同時實驗證實腺病
3、毒轉(zhuǎn)染的骨骼肌細(xì)胞過度表達(dá)PKC可促進(jìn)GLUT1由儲存囊泡向細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運,且能增加GLUT1活性.本實驗利用原代培養(yǎng)的PMCs研究高糖、PKC激動劑-PMA對PMCs細(xì)胞膜上GLUT1的調(diào)節(jié),并觀察經(jīng)典型PKC(cPKC)抑制劑--Go6976對GLUT1的影響,為進(jìn)一步探討如何減少葡萄糖的吸收,從而增加UF提供理論依據(jù).結(jié)論:1.大鼠PMCs普遍表達(dá)GLUT1.2.葡萄糖以濃度依賴方式上調(diào)PMCs細(xì)胞膜上GLUT1的蛋白表達(dá),同時伴有P
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