葡萄糖對(duì)腹膜間皮細(xì)胞的損害及其中活性氧所起作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：1.研究葡萄糖、過(guò)氧化氫、抗氧化劑對(duì)于人腹膜間皮細(xì)胞（humanperitoneal mesothelial cell,HPMC）細(xì)胞周期的影響及其機(jī)制.2.研究葡萄糖、過(guò)氧化氫、抗氧化劑對(duì)于HPCM增殖的影響.3.研究葡萄糖、過(guò)氧化氫、抗氧化劑對(duì)于HPMC表達(dá)趨化蛋白的影響.方法：1.流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期中G1期細(xì)胞的比例,RT-PCR法測(cè)定細(xì)胞周期素依賴的激酶抑制劑（cyclin-dependent kinase lnhib

2、itor,CKI）p21<'Waf1>、p27<'Kip1>的基因表達(dá);細(xì)胞免疫組化法及Western Blotting法測(cè)定p21、p27的蛋白水平.2.<'3>H-TdR摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖率.3.TR-PCR法測(cè)定趨化因子IL-8、MCP-1基因水平,ELISA法測(cè)定IL-8的蛋白水平.結(jié)論：1.高糖、外源性過(guò)氧化氫可使HPMC呈現(xiàn)肥大,細(xì)胞周期停滯,且高糖增加了過(guò)氧化氫的毒性,高糖的這種作用與內(nèi)源性的活性氧（過(guò)氧化氫）有關(guān),阻斷之

3、可使細(xì)胞周期停滯改善.高糖、過(guò)氧化氫的細(xì)胞周期停滯作用還與p21、p27表達(dá)增加有關(guān),且內(nèi)源性過(guò)氧化氫參與了高糖對(duì)p21表達(dá)的調(diào)節(jié),而在高糖對(duì)p27的調(diào)節(jié)中則可能關(guān)系不大.2.高糖、過(guò)氧化氫可使HPMC的增殖受到抑制,加入抗氧化劑可改善,提示臨床上抗氧化治療可能有益.3.高糖、過(guò)氧化氫可使HPMC表達(dá)IL-8上升,高糖的作用與內(nèi)源性的過(guò)氧化氫有關(guān),提示臨床上抗氧化治療對(duì)改善腹膜透析液的生物相容性有益;高糖可使HPMC表達(dá)MCP-1上升,