葡萄糖腹透液對單層人腹膜間皮細(xì)胞通透性的影響.pdf

1、超濾衰竭是目前腹膜透析(PD)患者退出治療的最主要原因之一。大量研究證實(shí)，高濃度葡萄糖腹透液(PDS)的長期應(yīng)用不但可造成的腹膜通透性升高，而且損傷后修復(fù)再生能力同樣受到抑制，這種反復(fù)的損傷和修復(fù)異常將引起腹膜高濾過狀態(tài)甚至細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)的改變，最終導(dǎo)致超濾衰竭的發(fā)生。因此，研究PDS中葡萄糖成分在HPMC的高通透性改變和修復(fù)受抑過程中是否起著關(guān)鍵作用，對于透析超濾衰竭和腹膜纖維化的防治具有重要意義。但目前具體機(jī)制尚不

2、明確。最新研究發(fā)現(xiàn)，間皮細(xì)胞單層融合狀態(tài)下的跨細(xì)胞電阻值(Transmesothelial electrical resistance，TER)是反映間皮細(xì)胞層通透性的靈敏指標(biāo)，這一技術(shù)為我們研究葡萄糖PDS對HPMC通透性的影響的問題提供了新的思路和方法。 目的： 觀察不同濃度葡萄糖腹透液對單層HPMC增殖能力，通透性以及遷移修復(fù)能力的影響，研究葡萄糖成分是否是導(dǎo)致長期PD患者腹膜高通透性和超濾衰竭的重要因素，以探討超

3、濾衰竭和腹膜纖維化的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。 方法： 體外培養(yǎng)HPMC，用不同濃度葡萄糖PDS(1.5％、2.5％、4.25％)分別與DMEM混合成1:1的實(shí)驗(yàn)干預(yù)液，另設(shè)單純DMEM為對照組。作用各組細(xì)胞24小時(shí)后，四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法測定細(xì)胞增殖；采用雙池培養(yǎng)皿構(gòu)建人腹膜間皮細(xì)胞體外通透性模型，實(shí)驗(yàn)干預(yù)液分別作用于各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞0、3、6、12、24小時(shí)，采用TER技術(shù)測定葡萄糖對單層HPMC通透性的影響；實(shí)驗(yàn)干預(yù)液作

4、用于各實(shí)驗(yàn)組24和48小時(shí)，采謂劃痕損傷實(shí)驗(yàn)觀察葡萄糖對HPMC細(xì)胞修復(fù)再生能力的影響。 結(jié)果： 葡萄糖腹透液干預(yù)HPMC24小時(shí)后，與對照組比較均可明顯抑制HPMC的增殖(P<0.05)，且腹透液葡萄糖濃度越高，抑制越明顯。HPMC的TER值隨時(shí)間的延長而逐漸下降，且葡萄糖濃度越高，下降趨勢越明顯(P<0.005)。腹透液作用于各實(shí)驗(yàn)組24小時(shí)后，HPMC遷移修復(fù)能力與對照組相比明顯受抑，且葡萄糖濃度越高，其抑制作用越