LKB1(Thr336)磷酸化多克隆抗體的制備及在細(xì)胞中表達(dá)的檢測(cè).pdf

1、1安徽大學(xué)碩士學(xué)位論文LKB1LKB1（Thr336Thr336）磷酸化多克隆抗體的制備及在細(xì)胞中表達(dá)的）磷酸化多克隆抗體的制備及在細(xì)胞中表達(dá)的檢測(cè)檢測(cè)PreparationPreparationIntracellularExpressiondetectionofdetectionofPhosphylatedLKB1(Thr336)PolyclonalAntibody姓名：名：任艷敏任艷敏學(xué)科專(zhuān)業(yè)：學(xué)科專(zhuān)業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究方向

2、：研究方向：細(xì)胞凋亡與腫瘤發(fā)生細(xì)胞凋亡與腫瘤發(fā)生指導(dǎo)教師：指導(dǎo)教師：黃蓓黃蓓完成時(shí)間：完成時(shí)間：20200808553LKB1LKB1（Thr336Thr336）磷酸化多克隆抗體的制備及在細(xì)胞中表達(dá)的檢測(cè)磷酸化多克隆抗體的制備及在細(xì)胞中表達(dá)的檢測(cè)摘要PJS綜合癥是一種遺傳性腫瘤綜合癥，該病患者患腫瘤的幾率增加。致病基因編碼的核定位激酶LKB1作為腫瘤抑制子在發(fā)揮作用，但是LKB1在細(xì)胞中調(diào)控的機(jī)制及生理基礎(chǔ)都不清楚。研究表明LKB1在細(xì)

3、胞中被磷酸化并且Thr336磷酸化位點(diǎn)在LKB1抑制細(xì)胞生長(zhǎng)中起到重要的作用。為了研究LKB1在不同細(xì)胞中的表達(dá)規(guī)律及其對(duì)細(xì)胞增殖的抑制功能，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)生物信息學(xué)方法選取LKB1Thr336位點(diǎn)附近10個(gè)氨基酸且使Thr336位點(diǎn)磷酸化，并鉸鏈上BSA，以此為抗原，對(duì)兔子進(jìn)行免疫，制備的抗血清通過(guò)Westernblot檢測(cè)抗體效價(jià)，并用LKB1抗體和pLKB1(Thr336)抗體分別對(duì)人正常肝臟細(xì)胞HL7702、人胚腎細(xì)胞HEK293、