變形桿菌耐藥性分析及其產(chǎn)ESBLs的檢測(cè)和基因型分析.pdf

1、目的：了解本地區(qū)變形桿菌的耐藥現(xiàn)狀，指導(dǎo)臨床合理用藥。本研究收集了來自安徽省細(xì)菌耐藥中心的125株變形桿菌，分析其抗生素敏感性、超廣譜β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生率及所產(chǎn)ESBLs的基因型別。 材料與方法： 收集2004年1月至2005年5月間安徽省細(xì)菌耐藥中心的125株變形桿菌。對(duì)所有菌株使用美國(guó)MicroScan WalkAway-40全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏分析儀進(jìn)行鑒定藥敏試驗(yàn)。 對(duì)所有菌株進(jìn)行超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的初篩和確

2、證實(shí)驗(yàn)，按2005年NCCLS(現(xiàn)更名為Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)的標(biāo)準(zhǔn)讀取結(jié)果。 用根據(jù)GenBank的基因序列設(shè)計(jì)(沈斷錄博士)的TEM組、SHV組、CTX-M組、OXA組和TOHO組，共8對(duì)通用引用分別對(duì)臨床分離的產(chǎn)ESBLs的奇異變形桿菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后對(duì)通用引物擴(kuò)增陽性者進(jìn)行CDS全長(zhǎng)引物的PCR擴(kuò)增。同時(shí)對(duì)PCR陽性菌株進(jìn)行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移接合實(shí)驗(yàn)

3、。 微量稀釋法分析125株變形桿菌對(duì)13種抗菌藥物的MIC，了解產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥情況。 結(jié)果： MicroScan藥敏結(jié)果顯示變形桿菌對(duì)青霉素類的氨芐西林(AMP)和哌拉西林(PIP)的耐藥率分別為64.6％和32.0％；對(duì)氨芐西林/舒巴坦(AMP/SUL)和哌拉西林/他唑巴坦(PIP/TAZ)的耐藥率分別為59.6％和4.2％。變形桿菌對(duì)一、二代頭孢菌素頭孢噻吩、頭孢唑啉和頭孢呋肟的耐藥率依次為29.4％

4、、27.7％和25.4％。變形桿菌對(duì)三、四代頭孢菌素的耐藥率均在17％以下，依次為頭孢他啶(10.3％)、頭孢曲松(14.9％)、頭孢噻肟(15.3％)和頭孢吡肟(16.3％)，其中頭孢他啶的耐藥率最低。阿米卡星的耐藥率為13.0％，遠(yuǎn)低于慶大霉素(39.7％)和妥布霉素(27.4％)。所有菌株對(duì)亞胺培南均敏感。本地區(qū)產(chǎn)ESBLs的變形桿菌的檢出率為7.2％，以頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢泊肟為底物時(shí)檢出率分別為60.0％、20.0％、26

5、.7％，頭孢噻肟的檢出率最高。 除亞胺培南外，產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥率均顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌株(P<0.05)。 本地區(qū)奇異變形桿菌中流行的是CTX-M型ESBLs (3株為CTX-M-14，1株為CTX-M-3)。據(jù)我們所知，國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道奇異變形桿菌中CTX-M型ESBLs的流行。此外，TEM-1b廣譜β-內(nèi)酰胺酶也在奇異變形桿菌中普遍存在。 結(jié)論： 頭孢噻肟在初篩實(shí)驗(yàn)和確證實(shí)驗(yàn)中均有較高的敏感性

6、，是本地區(qū)檢測(cè)ESBLs的首選。藥敏結(jié)果提示臨床上在治療變形桿菌引起的感染時(shí)，應(yīng)根據(jù)病人具體情況和藥敏試驗(yàn)結(jié)果區(qū)別對(duì)待產(chǎn)ESBLs菌和非產(chǎn)ESBLs菌。對(duì)非產(chǎn)ESBLs菌，可選用耐藥率較低的頭孢西丁、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢吡肟、阿米卡星及β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合劑類的哌拉西林/他唑巴坦等；對(duì)產(chǎn)ESBLs菌，碳青霉烯類的亞胺培南是經(jīng)驗(yàn)用藥的首選。 本研究中奇異變形桿菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的基因型包括CTX-M14、