PUMA、P-gp和GST-π在宮頸鱗癌患者新輔助化療前后癌組織中的表達(dá).pdf

1、背景和目的：
　　 宮頸癌(cervical cancer)是全球婦女惡性腫瘤中僅次于乳腺癌的最常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)病年齡呈現(xiàn)明顯的年輕化傾向，且發(fā)病率有上升趨勢。早期宮頸癌主要采取手術(shù)治療的方式，晚期主要采用放射治療。但是對于局部腫瘤較大和有微轉(zhuǎn)移的中晚期年輕患者，為縮小腫瘤體積，降低腫瘤臨床分期，增加手術(shù)機會，保留卵巢和陰道功能，20世紀(jì)80年代臨床上開始試用新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy，

2、NACT)。NACT是指在采取局部治療（手術(shù)或放療）前進行的系統(tǒng)性的輔助性細(xì)胞毒性藥物治療，又稱先期化療或術(shù)前化療。目前，多項研究均支持了NACT在局部晚期宮頸癌治療中的有效性。
　　 紫杉類和鉑類藥物靜脈聯(lián)合化療是目前宮頸癌術(shù)前化療最常用方案，患者耐受性好，有很好的臨床反應(yīng)。但并非所有患者均對化療敏感。對化療不敏感的患者實施NACT，不僅延誤了手術(shù)時機，加重了患者的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)，而且化療藥物的毒副反應(yīng)會加重病情。因此尋找化療敏感的

3、生化指標(biāo)，預(yù)測患者對化療的敏感性，對宮頸癌的治療具有重要意義。
　　 腫瘤是一種以細(xì)胞增殖分化與細(xì)胞死亡之間平衡失調(diào)為特征的疾病，因此細(xì)胞凋亡在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和消亡中起著重要作用。許多化療藥物正是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來實現(xiàn)其細(xì)胞毒性作用的，是化療有效的主要機制；而宮頸癌NACT無效的主要原因是多藥耐藥。一直以來，化療與反映腫瘤生物學(xué)行為的標(biāo)志物之間的關(guān)系都是研究的熱點，因此有關(guān)NACT與細(xì)胞凋亡和多藥耐藥間的關(guān)系也成為目前的研究焦

4、點。
　　 PUMA(p53 up-regulated modulator of apoptosis，p53上調(diào)凋亡調(diào)控因子)是2001年報道發(fā)現(xiàn)的具有快速強大促凋亡作用的p53下游基因，是Bcl-2家族中的一員。PUMA以p53依賴和p53不依賴兩條通路誘導(dǎo)凋亡。
　　 P-gp（P糖蛋白）是多藥耐藥基因MDRI的表達(dá)產(chǎn)物，為ATP依賴型藥物外排泵。它利用ATP水解釋放的能量將抗癌藥物從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運至細(xì)胞外，使細(xì)胞內(nèi)藥物

5、有效濃度減低，從而導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生，其表達(dá)水平與耐藥程度呈正相關(guān)。
　　 GST是一種多功能藥物代謝酶，有五種類型：α、μ、θ、π及膜結(jié)合微粒。其中GST-π與腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥關(guān)系最為密切。GST-π可通過催化方式降解藥物，來減弱化療藥物對腫瘤的殺傷作用，非特異性GST-π的結(jié)合作用可協(xié)助藥物通過P-gp形成的藥物排流泵，或通過酶結(jié)合方式將抗癌藥物從體內(nèi)排出，從而造成腫瘤細(xì)胞耐藥。
　　 本實驗通過免疫組化法對化療前后

6、宮頸鱗狀細(xì)胞癌（鱗癌）組織中凋亡相關(guān)基因PUMA和多藥耐藥相關(guān)基因表達(dá)產(chǎn)物P-gp、GST-π的檢測，比較化療前后PUMA、P-gp和GST-π三種因子在宮頸鱗癌細(xì)胞死亡過程中的表達(dá)情況，及其相互之間的關(guān)系。探討宮頸鱗癌中PUMA、P-gp和GST-π三種因子與新輔助化療敏感性、療效之間的關(guān)系，為宮頸鱗癌NACT尋找一種新的預(yù)測化療敏感性和評價療效的指標(biāo)。
　　 對象和方法：
　　 采用免疫組織化學(xué)染色法檢測50例行TC

7、方案靜脈化療的子宮頸鱗癌患者癌組織中化療前后PUMA、P-gp和GST-π的表達(dá)，并對這三種因子的表達(dá)之間的關(guān)系、三種因子表達(dá)與臨床療效間的關(guān)系進行研究。免疫組化實驗步驟按試劑說明書的程序進行。50例患者年齡為26到53歲，平均年齡為39.8歲。其中大于35歲者38例，小于等于35歲者12例。臨床分期為Ⅰb2期17例，Ⅱai期16例，Ⅱa2期10例，Ⅱb期7例。病理分級為高分化25例，中分化16例，低分化9例。該50例患者均無化療禁忌，

8、所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實。
　　 采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進行合理的統(tǒng)計和分析。以α=0.05作為檢驗標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 150例宮頸鱗癌患者中46例對NACT有反應(yīng)，其中7例為臨床完全緩解，39例為臨床部分緩解。總有效率為92％，其余4例表現(xiàn)為病情穩(wěn)定。不同的臨床分期和病理分級與NACT療效無顯著相關(guān)性(P＞0.05）。
　　 2宮頸鱗癌組織中PUMA、P-gp和GST-π表達(dá)的部

9、位分別在細(xì)胞核和（或）細(xì)胞漿、細(xì)胞漿和（或）胞膜、細(xì)胞漿和（或）細(xì)胞核中。NACT前，PUMA在有效組中的陽性表達(dá)強度高于無效組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；而P-gp和GST-π在有效組中的陽性表達(dá)強度均低于無效組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3 NACT有效組和無效組，化療后PUMA、P-gp和GST-π的陽性表達(dá)強度均較化療前高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4經(jīng)相關(guān)性檢驗化療前后宮

10、頸鱗癌組織中PUMA與P-gp、PUMA與GST-π的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1紫杉醇-卡鉑方案的靜脈化療對富頸鱗癌療效較好。宮頸鱗癌臨床病理特征與NACT療效無關(guān)。
　　 2宮頸鱗癌組織中PUMA的高表達(dá)和P-gp、GST-π的低表達(dá)有望成為NACT敏感的篩選指標(biāo)。
　　 3紫杉醇-卡鉑方案有可能是通過上調(diào)胞核和（或）胞漿中PUMA的表達(dá)來達(dá)到抗腫瘤作用的。
　　 4在NACT中，P