1型糖尿病模型大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)的研究.pdf

1、目的：
　　 觀察1型糖尿病模型大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)的變化特點(diǎn)，探討糖尿病性骨質(zhì)疏松大鼠骨代謝變化的關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)，為尋找預(yù)防和治療糖尿病性骨質(zhì)疏松合理的干預(yù)時(shí)機(jī)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)分組與模型制作
　　 64只6-8周齡雌性Wistar大鼠，隨機(jī)分為對照組（C組）和模型組（D組）。實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠一次性腹腔注射60mg/kg的鏈脲佐菌素(STZ)。C組和D組再根據(jù)造模后取樣時(shí)間第1天、

2、第1周、第2周、第3周、第4周、第8周、第12周、第16周隨機(jī)分為C1d、C1w、C2w、C3w、C4w、C8w、C12w、C16w組和D1d、D1w、D2w、D3w、D4w、D8w、D12w、D16w組，共16組(n=4)。
　　 2.標(biāo)本采集
　　 C組、D組大鼠分別于各取樣時(shí)間稱重后，分別以1％氯胺酮按100mg/kg腹腔注射行全身麻醉。取左側(cè)脛骨上段組織于4％多聚甲醛中固定。
　　 3.切片制作與指標(biāo)檢測

3、
　　 取脛骨上段分別進(jìn)行脫鈣、脫水、常規(guī)石蠟包埋、切片與HE染色。
　　 1)光鏡下觀察骨微結(jié)構(gòu)并拍照。
　　 2)用ImageJ1.37V圖像分析系統(tǒng)測定并根據(jù)公式計(jì)算骨小梁面積(Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數(shù)目(Tb.N)及骨小梁分離度(Tb.Sp)。
　　 結(jié)果：
　　 1.骨微結(jié)構(gòu)觀察
　　 C組骨微結(jié)構(gòu)隨時(shí)間進(jìn)展無明顯變化，均可見骨小梁豐富，骨小梁數(shù)目較多，骨

4、小梁寬度較寬，連接緊密。與C組相同時(shí)間點(diǎn)相比，D1d組無明顯差異。D1w組骨小梁開始出現(xiàn)稀疏，骨小梁之間開始出現(xiàn)斷裂。D4w組骨小梁寬度明顯變窄。D12w組、D16w組骨小梁明顯斷裂，數(shù)目減少。
　　 2.抗骨折能力觀察
　　 對照組各時(shí)間點(diǎn)大鼠脛骨上段均較堅(jiān)硬，不易切割。模型組大鼠脛骨上段于第8周開始較脆弱，易折斷。
　　 3.骨形態(tài)計(jì)量學(xué)
　　 1)與對照組相比結(jié)果:
　　 (1)造模后第1天

5、，與對照組(C1d)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低，Tb.Sp增加，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (2)造模后第1周，與對照組(C1w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Sp增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Tb.Th降低，Tb.N降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)造模后第2周，與對照組(C2w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Sp增加，Tb.Th降低，Tb.N降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

6、r>　　 (4)造模后第3周，與對照組(C3w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低(P＜0.05)。Tb.Sp增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01)。
　　 (5)造模后第4周，與對照組(C4w)相比，Tb.Ar降低，Tb.Th降低，Tb.N降低(P＜0.05)。Tb.Sp增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01)。
　　 (6)造模后第8周，與對照組(C8w)相比，Tb.N降低（P＜0.05），Tb.Ar

7、降低，Tb.Th降低，Tb.Sp增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 (7)造模后第12周、第16周，分別與對照組(C12w、C16w)相比，Tb.Ar均降低，Tb.N均降低，Tb.Th均降低，Tb.Sp均增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 2)模型組組間相比:
　　 (1)Tb.Ar于第1w即開始降低，此后持續(xù)降低，第4w降低達(dá)8.18％;于第4w-第8w間降低速度最快，幅度最大，達(dá)到4

8、3.83％;至第8w已降至D1d的48.42％。
　　 (2)Tb.Th于第1w即開始降低，此后持續(xù)降低，第4w降低達(dá)7.32％;于第4w-第8w間降低速度最快，幅度最大，達(dá)到43.76％;至第8w已降至D1d的47.88％。
　　 (3)Tb.N降低較緩和，于第8w-第12w降低幅度最大即0.66％。
　　 (4)Tb.Sp于第1w即開始增加，此后持續(xù)增加，第4w增加達(dá)8.76％;于第4w-第8w間增加速度最快