松蘿酸對小鼠急性肺損傷以及肺纖維化的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　急性肺損傷和肺纖維化是關(guān)系密切的兩類肺部疾病。急性肺損傷屬于急性肺部疾病，肺纖維化為慢性肺部疾病。這兩類疾病均是由多種致病因素導(dǎo)致，以肺泡毛細(xì)血管通透性增加和彌漫性炎癥細(xì)胞浸潤為主要病理表現(xiàn)的肺部疾病。目前人們對其發(fā)病機(jī)制仍然沒有清楚的認(rèn)識，仍然沒有確切有效的治療手段。松蘿是傳統(tǒng)的清熱化痰藥，具有清熱解毒和祛痰止咳等功效，主治痰熱咳嗽，慢性支氣管炎和肺結(jié)核等呼吸道疾病。松蘿酸是松蘿中的一類天然多酚類化合物?，F(xiàn)代藥理學(xué)研

2、究提示松蘿酸擁有抗炎、抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。因此本文將觀察松蘿酸對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷和博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化的干預(yù)作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.松蘿酸抗小鼠急性肺損傷研究
　　生存率試驗:將昆明小鼠按體重分層隨機(jī)分為正常對照組、脂多糖組和脂多糖+松蘿酸高、中、低劑量組。脂多糖+松蘿酸組小鼠分別被給予100mg/kg、50mg/kg和25mg/kg的松蘿酸，其余兩組小鼠均被給予0

3、.5％的吐溫80，連續(xù)5天，每天一次。末次給藥1小時后造模，脂多糖組、脂多糖+松蘿酸組小鼠氣管內(nèi)注射入脂多糖（20mg/kg，50μl），正常對照組小鼠被給予等容量的PBS，縫合傷口。氣管內(nèi)滴注脂多糖后，立即開始觀察并記錄小鼠的死亡數(shù)，統(tǒng)計死亡率，一天兩次，總共觀察6天。
　　作用機(jī)制試驗:將昆明小鼠按體重分層隨機(jī)分為正常對照組、脂多糖組、脂多糖+松蘿酸高、中、低劑量組和脂多糖+地塞米松組。脂多糖+松蘿酸組小鼠分別被給予100mg

4、/kg、50mg/kg和25mg/kg的松蘿酸，脂多糖+地塞米松組小鼠灌胃給予5mg/kg的地塞米松，其余兩組小鼠被給予0.5％的吐溫80，連續(xù)5天，每天一次。末次給藥1小時后造模，脂多糖組、脂多糖+松蘿酸組和脂多糖+地塞米松組小鼠氣管內(nèi)注射入LPS（5mg/kg，50μl），正常對照組小鼠氣管內(nèi)滴注等容量的PBS，縫合傷口。24小時后，處死小鼠，收集肺組織和支氣管肺泡灌洗液，進(jìn)行肺水腫和肺部的組織病理學(xué)變化的觀察;支氣管肺泡灌洗液中總

5、細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù);肺組織中MPO、SOD、H2O2、GSH及MDA的含量和TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和MIP-2的含量測定。
　　2.松蘿酸抗小鼠肺纖維化研究
　　將昆明小鼠隨機(jī)分為正常對照組、博萊霉素組、博萊霉素+松蘿酸高、中、低劑量組和博萊霉素+醋酸潑尼松組。除正常對照組腹腔注射生理鹽水，其余各組小鼠均腹腔注射博萊霉素15mg/kg，每天一次，共10天。腹腔注射博萊霉素第2天后，松蘿酸各劑量組和

6、醋酸潑尼松組小鼠灌胃給予100mg/kg、50mg/kg和25mg/kg的松蘿酸和5mg/kg的醋酸潑尼松(Prednisone Acetate，PA)，正常對照組和博萊霉素組給予相同劑量的0.5％吐溫80，作為溶劑對照，連續(xù)灌胃21天，每天一次，末次給藥1小時后，放血處死，收集肺組織，進(jìn)行肺纖維化小鼠肺系數(shù)和肺臟病理組織學(xué)改變的觀察;肺組織中MDA、SOD、 HYP、TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1的含量測定。
　

7、　結(jié)果:
　　1.松蘿酸抗小鼠急性肺損傷研究
　　研究發(fā)現(xiàn)松蘿酸對脂多糖所致急性肺損傷有明顯的抑制作用，能明顯延長急性肺損傷小鼠的平均生存時間，降低急性肺損傷小鼠的死亡率，改善脂多糖導(dǎo)致的小鼠肺部的水腫情況和肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，降低小鼠肺組織的毛細(xì)血管的通透性。在改善氧化應(yīng)激方面，松蘿酸還能明顯降低肺組織中的MDA、MPO和H2O2的含量和提高小鼠肺組織中的GSH和SOD的活性。在抑制炎癥反應(yīng)方面，松蘿酸能降低支氣管肺泡灌

8、洗液中的TNF-α、IL-6、IL-8以及MIP-2的含量以及升高IL-10的含量。
　　2.松蘿酸抗小鼠肺纖維化研究
　　在博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型中發(fā)現(xiàn)松蘿酸可以降低小鼠肺系數(shù)和改善肺組織病理組織結(jié)構(gòu)的異常變化。此外，松蘿酸還降低了肺組織中MDA、HYP、TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1的含量，提高SOD含量。
　　結(jié)論:
　　預(yù)防性給予松蘿酸可提高急性肺損傷小鼠的生存率，對脂多糖所致急性