臍血T淋巴細胞免疫學特性的實驗研究.pdf

1、目的:自60年代以來,造血干細胞移植(HSCT)在治療血液系統(tǒng)惡性疾病、實體瘤及某些先天遺傳性疾病等方面取得了巨大成功.目前用于臨床移植的造血干細胞來源主要有三種:骨髓、外周血和臍血.臍血作為骨髓、外周血后的第三種造血干細胞的來源,以其資源優(yōu)勢、獨特的生物學特性,可進行HLA1-3個位點不合的同胞及無關供者間的移植,移植后移植排斥(HVGR)及移植物抗宿主病(GVHD)的發(fā)生率低且程度輕,能使受者全面地重建造血及免疫功能等優(yōu)點<'[1]

2、>,正日益受到人們關注.臍血移植HVGR和GVHD發(fā)生率低、程度輕的原因和機制目前還不十分清楚<'[2]>.由于移植免疫主要與T淋巴細胞有關,因此該題對臍血T淋巴細胞的免疫學特性進行了以下研究,對臍血干細胞移植HVGR和GVHD的部分機制進行探討.方法:1.采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)法測定臍血和成人外周血T淋巴細胞集落(CFU-TL)的產率.2.采用淋巴細胞液體培養(yǎng)法,即以臍血和成人外周血單個核細胞3×10<'9>/L加入含20﹪牛血清,

3、100mg/L PHA的IMDM的培養(yǎng)體系內培養(yǎng),分別在48小時、72小時收集上清,用雙抗體夾心ELISA法檢測培養(yǎng)上清中IL-4、IFN-γ的誘生水平.3.臍血T淋巴細胞對成人T淋巴細胞的抑制實驗:將男嬰臍血淋巴細胞與成人女性淋巴細胞共同培養(yǎng)作為實驗組,將成人男性淋巴細胞與成人女性淋巴細胞共同培養(yǎng)作為對照組.培養(yǎng)72小時后常規(guī)方法制備染色體,進行Q分帶,觀察具有Y染色體的核分裂象所占的百分率.結論:1.臍血CFU-TL的形成能力低于外

4、周血,提示臍血的T淋巴細胞存在增生水平較低的內在缺陷,決定了其功能欠成熟,對組織配型不符的HLA抗原有一定的免疫耐受性,可能為臍血移植GVHD發(fā)生率低且程度輕的機制之一.2.臍血淋巴細胞分泌細胞因子IFN-γ、IL-4的水平明顯低于外周血,臍血IL-4/IFN-γ比值明顯高于外周血IL-4/IFN-γ比值.提示臍血的細胞免疫功能低下,與成人比較呈現(xiàn)Th2相對優(yōu)勢狀態(tài),有一定的免疫耐受能力,為臍血移植后GVHD發(fā)生低下的可能機制之一.3.