溴酸鉀誘導(dǎo)臍血淋巴細(xì)胞適應(yīng)性反應(yīng)及機(jī)制研究.pdf

1、目的:本研究以人臍血淋巴細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料,探討低劑量溴酸鉀能否誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的適應(yīng)性反應(yīng)以及相關(guān)機(jī)制,初步揭示飲用水中溴酸鹽對(duì)機(jī)體可能造成的影響。
　　方法:以新生兒臍血淋巴細(xì)胞為研究對(duì)象,采用傳統(tǒng)淋巴細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn),將淋巴細(xì)胞分為預(yù)處理組和非預(yù)處理組,預(yù)處理組給予終濃度0.1μmol/ml溴酸鉀處理,非預(yù)處理組不做處理,培養(yǎng)48小時(shí)后分別用不同劑量的毒性濃度溴酸鉀、以及致微核效應(yīng)較強(qiáng)的陽性藥物MMC、BLM繼續(xù)作用細(xì)胞24小時(shí),常規(guī)收

2、獲鏡檢。細(xì)胞免疫組織化學(xué)中,首先常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞48小時(shí),然后分別給以低劑量溴酸鉀組和毒性劑量溴酸鉀組終濃度0.01μmol/ml、2.5μmol/ml的溴酸鉀,陰性對(duì)照不做處理,繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)后收獲;陽性對(duì)照在收獲前30 min給以終濃度20μg/ml BrdU。常規(guī)收獲和免疫組化方法處理后, DAB染色鏡檢。
　　結(jié)果:微核試驗(yàn)結(jié)果顯示,在毒性劑量溴酸鉀24小時(shí)實(shí)驗(yàn)中,預(yù)處理組和非預(yù)處理組分別給以2.0μmol/ml、2.5μm

3、ol/ml、3.0μmol/ml、3.5μmol/ml溴酸鉀,預(yù)處理組較非預(yù)處理組淋巴細(xì)胞微核率有不同程度的下降(P<0.05),但進(jìn)一步比較相同處理劑量下預(yù)處理組和非預(yù)處理組間陽性微核數(shù)差異,未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>α’);在不同劑量MMC和BLM實(shí)驗(yàn)中,預(yù)處理組和非預(yù)處理組分別給以0.4μg/ml、0.8μg/ml、1.2μg/ml MMC和5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml BLM,預(yù)處理組較非預(yù)處理組淋巴細(xì)胞陽性微核數(shù)有

4、不同程度的下降(P<0.05),同時(shí)進(jìn)一步比較相同處理劑量下預(yù)處理組和非預(yù)處理組間陽性微核數(shù),發(fā)現(xiàn)顯著性差異(P>α’)。
　　免疫組化結(jié)果顯示,正常對(duì)照組和低劑量溴酸鉀處理組的淋巴細(xì)胞DAB染色結(jié)果為陰性(-),BrdU處理過的陽性組細(xì)胞DAB染色結(jié)果為強(qiáng)陽性(+++),毒性劑量溴酸鉀組淋巴細(xì)胞DAB染色結(jié)果為陽性(+)。
　　結(jié)論:微核實(shí)驗(yàn)顯示,臍血淋巴細(xì)胞經(jīng)過低劑量溴酸鉀預(yù)處理后再分別給以不同的較高劑量毒性藥物處理,淋