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1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文cdc6和mcm5在尿脫落細(xì)胞和膀胱腫瘤組織中的表達(dá)姓名：安成申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床實(shí)驗(yàn)與診斷學(xué)指導(dǎo)教師：楊振華;張曼2002.1.1日U 吾膀胱癌是世界范圍最常見的惡性腫瘤之一，尤其是在發(fā)達(dá)國家有較高的發(fā)病率，位于常見腫瘤的第六位。近8 0 ％- - 9 0 ％的膀胱癌發(fā)生在上皮或粘膜下層( r a 、T i s 和T i ) ，這些表淺的癌灶是由粘膜層的惡性尿路上皮細(xì)胞構(gòu)成的乳頭狀瘤

2、，或是由上皮內(nèi)彌散的惡性細(xì)胞形成平坦的原位癌。表淺膀胱癌最初和最經(jīng)典的治療手段是經(jīng)尿道膀胱鏡切除術(shù)，盡管該手術(shù)能完全切除腫瘤，但5 年內(nèi)復(fù)發(fā)率超過5 0 ％。通常情況下，復(fù)發(fā)的腫瘤級(jí)別并沒有改變，但有j ％一3 0 ％的復(fù)發(fā)腫瘤因侵犯膀胱肌層而發(fā)生轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致療效不佳，預(yù)后極差，5 年內(nèi)生存率低于6 0 ％。因而早期診斷和術(shù)后監(jiān)測是進(jìn)一步提高膀胱癌療效的關(guān)鍵。目前，尿脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查仍為篩查膀胱癌的金標(biāo)準(zhǔn)，而膀胱鏡檢查為術(shù)后監(jiān)測的金標(biāo)準(zhǔn)

3、。但由于尿脫落細(xì)胞對(duì)低分級(jí)或細(xì)胞分化較好的腫瘤具有較低的敏感性，而且需要有豐富經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師進(jìn)行診斷，具有一定的主觀性，因而限制其在早期診斷中的應(yīng)用：而膀胱鏡檢查為有創(chuàng)性檢查，在給患者帶來身體上痛苦的同時(shí)也帶來一定的精神負(fù)擔(dān)。因此各地學(xué)者紛紛探討研究更特異、更敏感、無創(chuàng)性的檢測指標(biāo)，以提高膀胱癌患者的生存質(zhì)量。C D C 6 蛋白是D N A 復(fù)制起始階段的關(guān)鍵蛋白，是L i t e n s es y s t e m 與染色質(zhì)結(jié)合所需的

4、一個(gè)“橋梁”因子：M C M s 蛋白是D N A 復(fù)制起始和延伸的首要因子，二者均是形成前復(fù)制復(fù)合物的主要成份，是確保細(xì)胞在一個(gè)細(xì)胞周期中只復(fù)制一次的重要因子。腫瘤細(xì)胞是典型的惡性增殖細(xì)胞，在無序增殖的同時(shí)伴隨著D N A 復(fù)制，因而在腫瘤細(xì)胞中存在高表達(dá)的C D C 6 蛋白和Ⅵc M 蛋白。人們亦通過實(shí)驗(yàn)證明這一推論：C D C 6 蛋白和M c M 5 蛋白( M C M 5 蛋白是M C M S 蛋白家族中的成員) 在腫瘤組織

5、中的表達(dá)高于其在腫瘤旁組織或正常組織中的表達(dá)，且與腫瘤的級(jí)別成正相關(guān)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為．基因水平的檢測比蛋白水平的檢測更具有早期診斷的應(yīng)用價(jià)值。P C R 技術(shù)以其敏感、特異為特點(diǎn)，已經(jīng)成為分子生物學(xué)中的重要方法，在其應(yīng)用的初期，由于對(duì)污染認(rèn)識(shí)的不足，限制了它的使用。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，建立了一系列防污染的措旌和方法，使P C R 技術(shù)在早期診斷方面發(fā)揮巨大優(yōu)勢。因此我們根據(jù)c d c 6 、m c m 5 基因的序列來設(shè)計(jì)特異引物，