Mcm7、mcm5及cyclin E蛋白在直腸癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　 大腸癌包括結(jié)腸癌和直腸癌，是常見的消化道惡性腫瘤。近年來，隨著人民生活水平的改善和生活習(xí)慣的改變，我國大腸癌的發(fā)病率與死亡率明顯升高。大腸癌治療目前最有效的手段仍是手術(shù)切除，但并非所有的患者都可以手術(shù)切除，尤其初治時是分期較晚的患者，因為腫瘤患者病變分期的早晚在很大程度上影響著手術(shù)治療的效果。大腸癌起病隱匿，早期多無癥狀，一旦出現(xiàn)癥狀，病情往往已經(jīng)非常嚴(yán)重，甚至已經(jīng)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，失去手術(shù)機會。即使是原發(fā)腫瘤已

2、被切除的患者，也有相當(dāng)多的患者死于局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。大腸癌的生存期與是否存在淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，然而轉(zhuǎn)移形成的機制尚不十分明確。盡管在近些年大腸癌的綜合治療效果已經(jīng)取得了很大的改善，但是已有轉(zhuǎn)移的患者的治療前景仍不容樂觀，因此，大腸癌的早期診斷和轉(zhuǎn)移風(fēng)險的預(yù)計對這些患者預(yù)后的改善非常關(guān)鍵。但目前的臨床診治手段尚不能滿足，因此，尋找可靠的標(biāo)志大腸癌發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后的病理學(xué)指標(biāo)具有十分重要的意義。直腸癌占大腸癌的大部分，本研究重在尋

3、找標(biāo)記直腸癌早期診斷和預(yù)后的病理學(xué)指標(biāo)。
　　 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們認(rèn)識到許多生物分子與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)，有些已經(jīng)被證實對大腸癌的診斷及預(yù)后有重要意義，如mcm7、mcm5等。mcm7、mcm5屬于微小染色體維持蛋白家族(MCMs)，該家族是一組DNA復(fù)制準(zhǔn)許因子，共有mcm2～mcm7六個成員，在調(diào)節(jié)DNA復(fù)制及延伸中有十分重要的作用，同時與細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞異常增殖、腫瘤形成密切相關(guān)。在DNA復(fù)制起始與

4、延伸過程中，MCM蛋白能確保DNA的復(fù)制在每個細(xì)胞周期僅發(fā)生一次，DNA復(fù)制調(diào)節(jié)紊亂的結(jié)果將導(dǎo)致基因組的不穩(wěn)定和細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。目前，MCM蛋白是國內(nèi)外研究的熱點。分子生物學(xué)研究證實，McM蛋白水平能夠敏感而特異地反映細(xì)胞的增殖情況，是較傳統(tǒng)的增殖分子如PCNA、Ki-67更為可靠的增殖指標(biāo)，在判斷腫瘤的惡性度、增殖程度及評估預(yù)后方面具有重要意義。同時，MCM水平的增高不但標(biāo)志著惡性細(xì)胞的增殖，而且也標(biāo)志著非典型性細(xì)胞和潛在惡性細(xì)胞的增

5、生。本研究旨在研究mcm7、mcm5及cyclinE在直腸癌發(fā)生發(fā)展中的變化，從而為尋找有價值的臨床病理學(xué)指標(biāo)及開發(fā)新的腫瘤治療靶點提供新思路。
　　 材料與方法：
　　 1．收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科手術(shù)切除的直腸腺癌組織標(biāo)本104例、直腸腺瘤組織標(biāo)本28例及正常直腸黏膜組織標(biāo)本36例。所有患者均為初治，術(shù)前未行放、化療及其他針對腫瘤的靶向治療。
　　 2．免疫組織化學(xué)SP法檢測mcm7、mcm5及cycl

6、inE蛋白在直腸腺癌、直腸腺瘤及正常直腸粘膜中的表達(dá)情況。并分析這三個指標(biāo)分別與大腸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系及三者的相關(guān)性，探討其在直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 3．采用SPSS17.0軟件對所有實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。同一指標(biāo)在不同病理指標(biāo)間的比較采用卡方檢驗或Fishers精確概率法，采用Spearman等級相關(guān)分析直腸癌組織mcm7、mcm5及cyclinE表達(dá)的相互關(guān)系。檢驗水準(zhǔn)為a=0.05。
　　 結(jié)果

7、r>　　 1．mcm7、mcm5在直腸組織中的表達(dá)情況：免疫組化結(jié)構(gòu)顯示mcm7、mcm5蛋白的陽性著色均定位于細(xì)胞核內(nèi)。Mcm7蛋白在直腸正常粘膜、腺瘤及直腸癌組織中的陽性表達(dá)率分別為27.78％(10/36)、53.57％(15/28)、82.69％(86/104)，三組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05），兩兩比較亦均有顯著性差異(P＜0.05);Mcm5蛋白在直腸正常粘膜、腺瘤及直腸癌組織中的陽性表達(dá)率分別為22.22％(8/

8、36)、42.86％(12/28)和76.92％(80/104)三組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05），兩兩比較亦均有顯著性差異（P＜0.05）。mcm7、mcm5在直腸癌組織中的表達(dá)與患者性別、年齡和腫瘤大小的相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而與腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的相關(guān)性有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.cyclinE蛋白在直腸組織中的表達(dá)情況：免疫組化結(jié)果顯示，cyclinE蛋白的陽

9、性著色定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞核中。cyclinE蛋白在直腸正常粘膜、腺瘤和直腸癌組織中的陽性表達(dá)率分別為11.11％(4/36)、28.57％(8/28)和67.31％(70/104)，三組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。CyclinE蛋白的表達(dá)與直腸癌患者的年齡、性別、腫瘤大小及浸潤深度的相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的相關(guān)性有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3.直腸癌組織

10、中mcm7、mcm5及cyclinE蛋白的表達(dá)均呈正相關(guān)（r＞0，P<0.05)關(guān)系。
　　 結(jié)論：
　　 1．mcm7、mcm5蛋白在正常直腸粘膜、直腸腺瘤及直腸癌組織中的表達(dá)逐漸升高，二者在直腸腺癌中的表達(dá)與腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)，提示mcm7、mcm5表達(dá)水平的上調(diào)是直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的早期事件，可能促進(jìn)的直腸癌的發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移。
　　 2．cyclin E蛋白在正常直腸

11、粘膜、直腸腺瘤及直腸癌組織中的表達(dá)逐漸升高，它在直腸癌中的表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)，提示cyclinE蛋白的異常高表達(dá)是直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的早期事件，可能促進(jìn)的直腸癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移。
　　 3．mcm7、mcm5和cyclinE蛋白在直腸腺瘤和直腸癌中的表達(dá)均呈正相關(guān)，提示三者的高表達(dá)可能有協(xié)同作用，共同參與了直腸癌的發(fā)生、浸潤及轉(zhuǎn)移過程。
　　 4．mcm7、mcm5和cyclinE蛋白可能是