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文檔簡介
1、目的:構建漢灘病毒重組腺病毒疫苗并分析其誘導的免疫效果,探索發(fā)展新型的漢灘病毒疫苗.方法:1.分別擴增和克隆漢灘病毒的M基因、G1和G2基因并進行序列分析.用桿狀病毒載體表達上述基因編碼的重組蛋白.2.用腺病毒載體構建重組腺病毒vAd-G1、vAd-G2及vAd-M,用Western blotting等方法鑒定目的基因的表達.3.采用重組腺病毒單獨免疫、重組腺病毒與DNA疫苗聯(lián)合免疫的方法接種小鼠,用ELISA、ELISPOT、流式細胞
2、分析等技術觀察誘導的體液免疫、細胞免疫和黏膜免疫反應.用表達漢灘病毒M片段的重組痘病毒攻擊免疫的地鼠,分析重組腺病毒疫苗誘導的保護效果.結果:1.用桿狀病毒表達系統(tǒng)在昆蟲細胞中成功表達了漢灘病毒G1和G2蛋白.表達的重組蛋白與病人血清和用滅活病毒免疫的兔血清均發(fā)生特異性反應.結果表明,表達的蛋白具有良好的抗原性.2.漢灘病毒重組腺病毒疫苗免疫動物能誘導特異的免疫應答.重組腺病毒vAd-M誘導出較高水平的中和抗體和細胞免疫應答.重組腺病毒
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