苯扎氯銨浸泡后純鈦抗菌性能的研究.pdf

1、目的:本實驗通過用苯扎氯銨溶液對純鈦試件進行浸泡處理，檢測該方法能否使純鈦具有抗菌性，并尋找最適宜的處理濃度。然后，通過老化實驗，觀察抗菌性持續(xù)的時間。
　　方法:
　　1.制作試件
　　醫(yī)用純鈦板經(jīng)打磨拋光后，用線切割機切割為10×10×1mm的小鈦片，然后用600目金相砂紙進行六個面打磨，每個面打磨50次。
　　2.抗菌處理
　　準(zhǔn)備0.1％、0.5％、1％的苯扎氯銨溶液以及滅菌蒸餾水，抗菌處理方式為浸

2、泡。隨機選24片純鈦片，先后用95％的乙醇和滅菌蒸餾水超聲振蕩30min，而后高溫高壓滅菌。將這些純鈦片隨機分為4組，每組6片—-A組:用0.1％苯扎氯銨溶液浸泡處理;B組:用0.5％苯扎氯銨溶液浸泡處理;C組:用1％苯扎氯銨溶液浸泡處理;D組:用滅菌蒸餾水浸泡處理，即陽性對照組。將這些鈦片裝入24個滅菌凍存管中，用移液器吸取四種溶液，每管放入2ml，鈦片在這四種溶液中分別浸泡1h后取出，然后再投入滅菌蒸餾水中漂洗10min，取出，室溫

3、干燥。
　　3.菌懸液制備
　　將ATCC90028標(biāo)準(zhǔn)白色念珠菌菌株復(fù)蘇后，用1640液體培養(yǎng)基稀釋，比濁儀調(diào)整，使菌液濃度呈0.5M備用。
　　4.檢驗抗菌性有無的實驗將以上4組鈦片分別用1ml菌懸液浸泡，在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h，再取出鈦片，2ml滅菌蒸餾水沖洗后，再將鈦片分別放入3ml新的無菌1640液體培養(yǎng)基中，振蕩器上振蕩1min，再將帶菌的液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到比濁專用管中，混勻后比濁儀比濁，記錄數(shù)值。讀數(shù)時

4、，用無菌的1640液體培養(yǎng)基作空白對照。
　　5.冷熱循環(huán)
　　隨機選取30片純鈦片，經(jīng)脫脂滅菌后用2ml1％的苯扎氯銨溶液浸泡1h，沖洗干燥后隨機平均分成5組，每組6片。其中1組不進行冷熱循環(huán)實驗，而是在滅菌蒸餾水中浸泡10天，其余4組裝于滅菌帶孔的容器中，分別在5℃和55℃的恒溫水浴中各浸泡30s，此為1次，反復(fù)進行此操作，分別冷熱循環(huán)1000次、2500次、5000次和10000次。
　　6.檢驗抗菌性持續(xù)時間的

5、實驗后期實驗分6組，分別是E組（未進行冷熱循環(huán)實驗，用滅菌蒸餾水浸泡10天）、F組（冷熱循環(huán)1000次）、G組（冷熱循環(huán)2500次）、H組（冷熱循環(huán)5000次）、I組（冷熱循環(huán)10000次）、J組（對照組，未用苯扎氯銨溶液處理鈦片，未進行冷熱循環(huán)實驗，同上述D組）。6組實驗所需時間不同，不同時間進行，保證實驗同時結(jié)束。然后將各組純鈦片放入1ml0.5M的菌懸液中，恒溫箱中培養(yǎng)24h，取出沖洗后放入3ml新的培養(yǎng)基中振蕩1min，然后再轉(zhuǎn)

6、移帶菌的液體培養(yǎng)基到比濁管中，混勻后比濁。讀數(shù)時，仍用無菌的1640液體培養(yǎng)基作空白對照。
　　7.數(shù)據(jù)分析
　　用SPSS14.0軟件對冷熱循環(huán)前的4組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，驗證苯扎氯銨溶液浸泡處理能否使純鈦具有抗菌性，并探索最適宜的抗菌濃度。再對冷熱循環(huán)后得到的6組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，觀察抗菌性能維持時間。
　　結(jié)果:
　　1.抗菌性有無的測定結(jié)果對A、B、C、D四組數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗后，發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)屬于非正態(tài)分布

7、，因此選用Kruskal-Wallis H非參數(shù)檢驗。按α=0.05水準(zhǔn)，可發(fā)現(xiàn)不同濃度的苯扎氯銨溶液處理純鈦后對抑制白色念珠菌的生長效果不同。具體進行兩兩比較發(fā)現(xiàn)，B組與對照組D、C組與對照組D均有顯著差異(P＜0.05)，而A組與對照組D無明顯差異（P＞0.05）。C組與A組之間也存在明顯差異(P＜0.05)，而B組與A組之間無顯著性差異(P＞0.05)。
　　2.抗菌性持續(xù)時間的測定結(jié)果對E、F、G、H、I、J六組數(shù)據(jù)進行正

8、態(tài)性檢驗后，發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)屬于正態(tài)分布，因此選用Dunnett-t檢驗，即E、F、G、H、I這五組均與對照組J組進行比較。按α=0.05水準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)不同的冷熱循環(huán)次數(shù)對純鈦的抗菌性能有影響。E、F、G這三組均與對照組J之間存在顯著性差異(P＜0.05)，而H、I這兩組與對照組J之間不存在顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.苯扎氯銨溶液浸泡純鈦后，可使純鈦具有抗菌性能，且最適宜的處理濃度為1％。
　　2.經(jīng)1％的苯