激素耐藥型與激素敏感型腎病綜合征兒童尿液雙向電泳圖譜分析.pdf

1、目的:建立激素耐藥型原發(fā)性腎病綜合征(SRNS)兒童、激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征(SSNS)兒童與正常兒童尿液全蛋白雙向凝膠電泳圖譜,分析差異的蛋白質(zhì)位點(diǎn),為研究原發(fā)性腎病綜合征糖皮質(zhì)激素耐藥的機(jī)制提供依據(jù)。 方法:研究對象共20例,其中SSNS(治療前)5例、SSNS(治療后)5例、SRNS 5例、正常對照組5例,提取各組尿液全蛋白,利用雙向凝膠電泳技術(shù)(2-DE),建立尿液全蛋白凝膠圖譜。應(yīng)用投射掃描儀對染色后的膠圖進(jìn)行掃描

2、,利用Image Master 2D V3.01分析軟件進(jìn)行凝膠圖像分析。 結(jié)果:測得SRNS組尿液2.DE凝膠的平均檢測點(diǎn)為206+8個,SSNS組(治療前)組尿液2.DE凝膠的平均檢測點(diǎn)是204+5個,SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠的平均檢測點(diǎn)是55+5個,正常對照組凝膠的平均檢測點(diǎn)是105+7個。SRNS組與SSNS組(治療前)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質(zhì)點(diǎn)66個,其中4個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)上調(diào)、11個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)

3、下調(diào)、51個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)"全"或"無";SRNS組與SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質(zhì)點(diǎn)33個,其中2個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)下調(diào)、31個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)"全"或"無";SSNS組(治療前)與SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質(zhì)點(diǎn)65個,均表達(dá)"全"或"無";SSNS組(治療后)與正常對照組尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質(zhì)點(diǎn)75個,其中1個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)上調(diào)、13個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)下調(diào)、61個蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)“全”或“無

4、”。 結(jié)論：本研究成功建立了分辨率高且重復(fù)性較好的SRNS兒童、SSNS兒童及正常兒童尿液全蛋白的2一DE圖譜；通過各組問尿液2-DE圖譜分析，獲得了一些有價(jià)值的信息，包括：①SRNS與SSNS患兒的尿液蛋白譜之間存在量與質(zhì)的差異；②發(fā)現(xiàn)了一些可能與INS激素耐藥有關(guān)的差異蛋白位點(diǎn)；③發(fā)現(xiàn)了一些與INS激素敏感有關(guān)的蛋白質(zhì)位點(diǎn)。本研究結(jié)果為進(jìn)一步運(yùn)用蛋白質(zhì)組質(zhì)譜技術(shù)從這些差異蛋白質(zhì)位點(diǎn)中尋找與INS激素耐藥抑或激素敏感相關(guān)的蛋白