血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測在小兒腎母細(xì)胞瘤預(yù)后監(jiān)測中的應(yīng)用.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測在小兒腎母細(xì)胞瘤預(yù)后監(jiān)測中的應(yīng)用姓名：樊玉霞申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：小兒外科指導(dǎo)教師：王家祥20070501鄭州人學(xué)彤i l j 學(xué)位論義 中文摘要D e s o r p t i o n ／l o n i z a y i o nT i m e o f F l i g h t - M a s sS p e c t r o m e t r y ，S E L D I ．T O F ．M S ) 技術(shù)是近

2、年開發(fā)的新型蛋白組學(xué)技術(shù)，應(yīng)用基因芯片的設(shè)計(jì)原理，把層析、質(zhì)譜等技術(shù)合理地與蛋白質(zhì)芯片結(jié)合，可檢測出傳統(tǒng)方法難以鑒定的蛋白質(zhì)和多肽，是發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)標(biāo)記物的理想方法，具有快速、靈敏、高通量等特點(diǎn)。我們利用S E L D I - T O F —M S 技術(shù)檢測腎母細(xì)胞瘤患兒術(shù)前術(shù)后血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的表達(dá)差異，探索腎母細(xì)胞瘤患兒預(yù)后監(jiān)測的新方法。研究目的檢測腎母細(xì)胞瘤患兒術(shù)前術(shù)后血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的表達(dá)差異，探索腎母細(xì)胞瘤患兒預(yù)后監(jiān)測的新方法。材

3、料與方法1 ． 臨床資科 血清標(biāo)本1 0 0 例均來自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院小兒外科，其中腎母細(xì)胞瘤術(shù)前標(biāo)本3 0 例、術(shù)后2 周2 4 例( 行根治術(shù)2 1 例，行姑息切除術(shù)3 例) 、術(shù)后3 個月和6 個月各2 3 例。3 0 例腎母細(xì)胞瘤標(biāo)本均經(jīng)2 位以上病理學(xué)醫(yī)師證實(shí)。其中男1 6 例，女1 4 例。年齡2 4 天～1 0 歲，平均2 ．8 + 0 ．1 歲；術(shù)前術(shù)后對比研究的2 4 例患兒中男1 3 例，女1 1 例，平均年齡2

4、 ．6 ±0 ．1 歲，術(shù)前均未接受放化療。門診體檢的健康d , J L 2 0 例作為正常對照組。與患兒年齡性別相配對。外周靜脈血標(biāo)本均于清晨空腹時抽取，靜置l h 后3 0 0 0r p m 離心1 0 m i n ，收集血清樣本，分裝儲存于一8 0 ℃保存。2 ．主要試劑和儀器 C H A P S 緩沖液，尿素，哪，醋酸鈉緩沖液，S P A ( S i n a p i n i c a c i d ) 均購自美國S i g

5、 m a 公司。蛋白芯片生物系統(tǒng)( C i p h e r g e nP B SI I + S E L D I —T O F —M S ) 和弱陽離子交換芯片W C X 2 均購自美國C i p h e r g e nB i o s y s t e m s 公司。3 ．實(shí)驗(yàn)步驟 血清標(biāo)本冰浴解凍，4 ℃離心；取9 6 孔板置冰盒上，每孔加u 9 ( 9b i U r e a ，2 ％C H A P S ，1 ％D T T ) 1 0u