富硒乳酸菌對亞急性肝損傷和肝纖維化動(dòng)物的保護(hù)效應(yīng)及其機(jī)制研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)采用化學(xué)污染物CCl<,4>腹腔注射ICR小鼠致亞急性肝損傷模型和CCl<,4>皮下注射SD大鼠致肝纖維化模型，日糧添加富硒乳酸菌對模型動(dòng)物進(jìn)行保護(hù)或轉(zhuǎn)歸，運(yùn)用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)，從免疫學(xué)、細(xì)胞學(xué)和生理毒理學(xué)角度，綜合觀察富硒乳酸菌對動(dòng)物體內(nèi)-些免疫細(xì)胞功能活動(dòng)、免疫介質(zhì)水平、肝臟脂質(zhì)過氧化狀態(tài)的影響，初步探討了富硒乳酸菌對CCl<,4>誘導(dǎo)的肝損傷的保護(hù)效應(yīng)以及對CCl<,4>誘導(dǎo)的肝纖維化動(dòng)物的轉(zhuǎn)歸作用及其機(jī)制。結(jié)果如下：

2、 1 富硒乳酸菌干預(yù)亞急性肝損傷小鼠轉(zhuǎn)歸效應(yīng)和免疫調(diào)控機(jī)制研究選用30只健康ICR小鼠，隨機(jī)分為3組，即對照組(C組)、ccl<,4>注射組(CCl<,4>組)，CCl<,4>-富硒乳酸菌制劑保護(hù)組(CCl<,4>-Se組)。通過腹腔注射CCl<,4>誘發(fā)小鼠亞急性肝損傷，連續(xù)4周。建模完成后，CCl<,4>-Se組飼喂富硒乳酸菌源制劑全價(jià)飼料轉(zhuǎn)歸5周。結(jié)果顯示：HE染色中，CCl<,4>-Se組較ccl<,4>組的肝臟損傷程度有明顯緩

3、解。CCl<,4>組血漿AST、ALT和Y-GT活性均高于C組，CCl<,4>-Se組較CCl<,4>組均有所降低，其中ALT活性顯著低于CCl<,4>組；CCl<,4>組肝組織勻漿GSH-Px活性在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后仍低于C組，而CCl<,4>-Se組顯著高于C組和CCl<,4>組；CCl<,4>組血漿TNF-a和IL-27Jk平高于C組，CCl<,4>-Se組TNF-a水平低于CCl<,4>組，IL-2水平在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)低于C組和CCl<,4

4、>組。CCl<,4>組脾臟CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞(％)以及CD4<'+>／CD8<'+>與C組相比均有所上升，其中CD4<'+>(％)顯著高于對照組，而CCl<,4>-Se組與C組相當(dāng)；CCl<,4>組脾臟T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)稍低于C組；CCl<,4>-Se組則顯著高于C組和CCl<,4>組。提示：富硒乳酸菌能通過改善和提高機(jī)體免疫功能活動(dòng)，有效地緩解CCl<,4>誘發(fā)的亞急性肝損傷。2富硒乳酸菌對大鼠肝纖維化發(fā)生干預(yù)作用及

5、其免疫調(diào)控機(jī)制研究選用36只健康SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為對照組(C組)、CCl<,4>注射組(CCl<,4>組)，CCl<,4>-富硒乳酸菌制劑保護(hù)組(CCl<,4>-Se組)。CCl<,4>組和CCl<,4>-Se組每3天-次皮下注射ccl<,4>誘發(fā)肝纖維化，共注射8周。期間，CCl<,4>-Se組飼喂富硒乳酸菌制劑全價(jià)飼料，結(jié)果顯示：CCl<,4>組大鼠肝臟指數(shù)最高，CCl<,4>-Se組有所下降；CCl<,4>組血漿AST和

6、AU、活性均高于或顯著高于C組，而CCl<,4>-Se組均介于兩者之間；CCl<,4>-Se組大鼠血漿TP和AL含量均比CCl<,4>組上升：CCl<,4>組肝組織勻漿GSH-Px和SOD活性與C組比較均明顯下降，而CCl<,4>-Se組的GSH-Px和SOD活性高于或明顯高于CCl<,4>組；CCl<,4>組肝勻漿中MDA含量和Hyp均高于C組，CCl<,4>-Se組則低于CCl<,4>組而接近C組：CCl<,4>組血漿TNF-α水平

7、較C組高，但CCl<,4>．Se組低于CCl<,4>組。CCl<,4>組血漿IL-6水平均低于C組，ccl<,4>-Se組較CCl<,4>組高；CCh組T-淋巴細(xì)胞(％)均呈顯著下降的趨勢，而CCl<,4>-Se組與C組相比雖見下降，但明顯高于CCl<,4>組，各組B．淋巴細(xì)胞(％)變化與T-淋巴細(xì)胞(％)相反。CCl<,4>組RBC-CRl花環(huán)率和RBC-IC花環(huán)率均低于C組，而CCl<,4>-Se組均高于CCl<,4>組，并與C組接

8、近；在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期，CCl<,4>組脾臟NK細(xì)胞活性和T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)均低于C組，CCl<,4>-Se組雖也低于C組，但高于或顯著地高于CCl<,4>組；CCl<,4>組大鼠脾臟CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞(％)及CD4<'+>／CD8<'+>比例呈現(xiàn)較大的波動(dòng)，富硒乳酸菌可以有效地緩解這種變化。提示：富硒乳酸菌能夠通過保護(hù)肝組織抗氧化酶活性，改善和提高機(jī)體免疫功能活動(dòng)，有效地干預(yù)肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展。3富硒乳酸菌干預(yù)肝纖維化大

9、鼠轉(zhuǎn)歸效應(yīng)及其免疫調(diào)控機(jī)制研究 38只健康SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為對照組(C組)、CCl<,4>注射自然轉(zhuǎn)歸組(CCl<,4>組)和CCl<,4>注射富硒乳酸菌干預(yù)轉(zhuǎn)歸組(CCl<,4>．Se組)。CCl<,4>組和CCl<,4>-Se組皮下注射CCl<,4>每周2次，共8 w建立肝纖維化模型。然后，CCl<,4>-Se組飼喂富硒乳酸菌制劑全價(jià)飼料，持續(xù)6 w觀察自然轉(zhuǎn)歸和富硒乳酸菌干預(yù)轉(zhuǎn)歸效應(yīng)。結(jié)果顯示：自然轉(zhuǎn)歸的CCl<,4>組

10、和富硒乳酸菌制劑干預(yù)轉(zhuǎn)歸的CCl<,4>-Se組肝臟指數(shù)都逐漸下降，但CCl<,4>-Se組下降的程度明顯強(qiáng)于CCl<,4>組。兩組血漿AST和ALT活性也隨轉(zhuǎn)歸時(shí)間而下降，且CCl<,4>-Se組下降的幅度和速度均優(yōu)于CCl<,4>組。CCl<,4>組肝組織勻漿GSH-Px活性雖有回升但仍低于或明顯低于C組，CCl<,4>-Se組在第2 w顯著低于C組，至第6 w接近C組水平。CCl<,4>組肝組織勻漿SOD活性在整個(gè)轉(zhuǎn)歸期間始終最低

11、，而CCl<,4>-Se組呈現(xiàn)較高水平。CCl<,4>組肝組織勻漿MDA含量始終高于C組，CCl<,4>-Se組較CCl<,4>組有所下降。CCl<,4>組血漿TNF-a水平雖有下降，但始終高于C組，而CCl<,4>-Se組介于其它兩組之間。CCl<,4>組血漿IL-6始終保持較高水平，而CCl<,4>-Se組與C組接近。CCl<,4>組和CCl<,4>-Se組脾臟NK細(xì)胞的活性在轉(zhuǎn)歸開始的第2 w均表現(xiàn)出較低的水平，并隨實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程而上

12、升，且CCl<,4>-Se組始終高于CCl<,4>組。CCl<,4>組脾臟T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)在整個(gè)轉(zhuǎn)歸期均低于C組，而ccl<,4>-Se組在第2 w時(shí)高于C組，至第6 w介于兩者之間。在整個(gè)轉(zhuǎn)歸期，cck組大鼠脾臟CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞(％)及CD4<'+>/CD8<'+>+比例波動(dòng)較大，富硒乳酸菌能夠有效調(diào)節(jié)這種變化。提示：與自然轉(zhuǎn)歸的肝纖維化大鼠相比，富硒乳酸菌能夠通過增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能活動(dòng)更有效地加速肝纖維化的轉(zhuǎn)歸