金水清治療改良IgA腎病大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：IgA腎病是原發(fā)性腎小球疾病中最常見(jiàn)的病理類(lèi)型之一，本研究通過(guò)建立改良IgA腎病大鼠模型，觀察中藥復(fù)方金水清對(duì)該模型的影響，探討金水清防治IgA腎病的作用機(jī)理。 方法：選擇雄性SPF級(jí)Wistar大鼠25只，隨機(jī)分為：正常對(duì)照組(正常組)、模型組、金水清早治療組(金早組)、金水清晚治療組(金晚組)和陽(yáng)性對(duì)照組(血尿安組)5組，每組5只，在口服牛血清白蛋白(BSA)和靜脈注射葡萄球菌腸毒素B (SEB)的基礎(chǔ)上，復(fù)加環(huán)境、飲

2、食因素，通過(guò)復(fù)合法造成具有中醫(yī)濕熱證表現(xiàn)的IgA腎病大鼠模型。金早組從第7周開(kāi)始灌服金水清，每日一次，至12周末；金晚組和血尿安組從第9周開(kāi)始分別灌服金水清和血尿安，每日一次，至12周末。處死動(dòng)物分別觀測(cè)：一般情況；尿沉渣鏡檢檢測(cè)尿紅細(xì)胞，雙縮脲法檢測(cè)尿蛋白定量；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)腎功能(尿素氮采用酶法，肌酐采用苦味酸法)；放射免疫法檢測(cè)血清中IL-6的含量，免疫組化法檢測(cè)腎組織中TGFβ<,1>的含量；光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察動(dòng)

3、物模型腎組織病理變化。 結(jié)果：1．一般情況：正常組從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至結(jié)束大鼠精神狀態(tài)、活動(dòng)及反應(yīng)性、進(jìn)食、大便性狀無(wú)明顯異常；模型組和各治療組造模后大鼠出現(xiàn)程度不等的倦怠嗜臥、毛發(fā)蓬松、進(jìn)食少、小便短赤、大便軟爛、舌質(zhì)暗紅，部分出現(xiàn)水腫、肛門(mén)紅腫等濕熱表現(xiàn)；各治療組大鼠治療后上述濕熱表現(xiàn)有明顯改善。2．經(jīng)檢測(cè)尿紅細(xì)胞及尿蛋白顯示：正常組始終未出現(xiàn)血尿和蛋白尿；各治療組血尿和蛋白尿明顯減少，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，金早

4、組與金晚組、血尿安組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，金晚組與血尿安組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3．腎功能(尿素氮、肌酐)檢測(cè)顯示：各治療組尿素氮、肌酐明顯降低，與模型組比較比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，金早組與金晚組、血尿安組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，金晚組與血尿安組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4．血清IL-6的含量檢測(cè)顯示：各治療組IL-6的含量明顯降低，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，金早組與金

5、晚組、血尿安組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，金晚組與血尿安組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫組化顯示：TGFβ<,1>在正常組大鼠腎小球和腎小管中無(wú)或有輕微的棕色陽(yáng)性表達(dá)；模型組則有較強(qiáng)的表達(dá)，包括系膜區(qū)及腎小管上皮細(xì)胞、近曲小管等部位表達(dá)較多；各治療組均有陽(yáng)性表達(dá)，部位基本相同，但程度有所減輕。經(jīng)圖象分析檢測(cè)OD值顯示：各治療組與模型組比較OD值明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。金早組與金晚組、血尿安組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、(P>0.05)。5．光鏡下可見(jiàn)：正常組腎小球系膜細(xì)胞及基質(zhì)無(wú)增生，毛細(xì)血管襻開(kāi)放，腎小球無(wú)萎縮，腎小管結(jié)構(gòu)基本規(guī)則，間質(zhì)無(wú)增生及炎細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組彌漫性腎小球系膜區(qū)增寬，腎小球系膜區(qū)呈分葉狀，系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)明顯增生，毛細(xì)血管管腔非常狹窄甚至閉塞，部分腎小球萎縮，腎小管問(wèn)質(zhì)有大量炎細(xì)胞漫潤(rùn)，腎小管上皮細(xì)胞腫脹變性，小管管腔閉塞；金晚組和血尿安組腎小球系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)輕度增生，毛細(xì)血管管腔輕度狹窄，腎小管上皮細(xì)胞變性，小管管腔部分開(kāi)

7、放，間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)；金早組腎小球系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)輕度增生，毛細(xì)血管管腔輕度狹窄或正常，腎小球無(wú)萎縮，腎小管上皮細(xì)胞輕度交性，間質(zhì)有少量炎細(xì)胞漫潤(rùn)。金早組病理改變較模型組、金晚組和血尿安組為輕。6.熒光顯微鏡下可見(jiàn)：正常組腎小球系膜區(qū)無(wú)或有很弱的IgA、IgG沉積；模型組腎小球系膜區(qū)有黃綠色團(tuán)塊狀強(qiáng)IgA熒光，IgG則在腎小球系膜區(qū)有中等強(qiáng)度顯示；各治療組腎小球系膜區(qū)IgA、IgG顯示為黃綠色顆粒狀熒光，強(qiáng)度較模型組為弱，以金早組熒光強(qiáng)