0-14日齡乳鴿消化生理特性的研究.pdf

1、本課題以0—14日齡自然哺喂乳鴿為試驗對象，隨機選取3日齡、8日齡、14日齡體重相近、健康的雄乳鴿各6羽，稱重，屠宰取樣。測定血清中相關(guān)生化指標、激素水平；分析鴿乳中常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸、免疫球蛋白水平及主要消化酶活性；小腸和胰腺中主要消化酶活性，進而研究了胰腺中胰蛋白酶原基因相對表達量，探討乳鴿消化道及消化酶發(fā)育規(guī)律。
　　 血清常規(guī)生化指標測定結(jié)果表明：14日齡乳鴿血清中總蛋白含量比3日齡和8日齡分別低3.97％(P＞0.0

2、5)和13.06％(P＜＜0.05)；8日齡乳鴿血清中鈣含量比3日齡和14日齡分別低10.19％(P＜0.05)和12.62％(P＜0.05)；3日齡乳鴿血清中磷含量比8日齡和14日齡分別高57.84％(P＜0.05)和59.02％(P＜0.05)。血清中白蛋白和尿酸含量在各日齡間無顯著差異(P＜0.05)。
　　 血清激素水平測定結(jié)果表明：14日齡乳鴿血清中T3含量比3日齡和8日齡分別高86.45％(P＜0.05)和12.36

3、％(P＜0.05)；3日齡乳鴿血清中胃泌素含量比8日齡和14日齡分別高15.78％(P＞0.05)和303.03％(P＜0.05)。血清中T4含量在各日齡間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 鴿乳中各種指標的測定結(jié)果表明：(1)鴿乳中免疫球蛋白3日齡鴿乳中IgA的含量比8日齡和14日齡分別高30％(P＜0.05)和71.05％(P＜0.05)；14日齡鴿乳中IgG含量比3日齡和8日齡分別高1.3％(P＜0.05)和0.96％(P

4、＜0.05)；3日齡鴿乳中IgM含量比8日齡和14日齡分別高29.29％(P＜0.05)和112.94％(P＜0.05)。(2)鴿乳中常規(guī)營養(yǎng)3日齡鴿乳中粗蛋白、粗脂肪的含量比8日齡和14日齡分別高111.93％(P＜0.05)、135.17％(P＜0.05)和256.19％(P＜0.05)、340.79％(P＜0.05)；3日齡鴿乳中粗灰分含量比8日齡和14日齡分別高14.59％(P＜0.05)和96.37％(P＜0.05)。各日齡鴿

5、乳中水分含量差異不顯著(P＞0.05)。(3)鴿乳中氨基酸含量共測出了17種氨基酸，3日齡鴿乳中各種氨基酸含量均明顯高于8日齡和14日齡鴿乳中氨基酸含量。其中3日齡、8日齡、14日齡鴿乳中必需氨基酸含量占總氨基酸的比例分別為68.13％、64.07％和63.67％，蛋氨酸占必需氨基酸的比例分別為4.28％、3.54％和3.71％。3日齡、8日齡、14日齡鴿乳中酸性氨基酸天冬氨酸和谷氨酸的含量占總氨基酸的比例分別為22.91％、24.94

6、％和25.56％。(4)鴿乳中主要消化酶活性鴿乳中3日齡鴿乳中淀粉酶活性比8日齡和14日齡分別高225.32％(P＜0.05)和362.20％(P＜0.05)；8日齡鴿乳中脂肪酶活性比3日齡14日齡分別高110.51％(P＜0.05)和66.69％(P＜0.05)：總蛋白水解酶活性14日齡鴿乳中最低，分別比3日齡和8日齡低50％(P＜0.05)和55.04％(P＜0.05)；胰蛋白酶和糜蛋白酶活性隨著日齡增加而升高，8日齡和14日齡時胰

7、蛋白酶和糜蛋白酶活性比3日齡分別高242.51％(P＜0.05)、344.08％(P＜0.05)和960％(P＜0.05)、1393.66％(P＜0.05)。
　　 小腸中主要消化酶活性測定結(jié)果表明：(1)十二指腸中主要消化酶活性脂肪酶活性3日齡時最高，比8日齡和14日齡分別高90.75％(P＜0.05)和67.48％(P＜0.05)；8日齡和14日齡時總蛋白水解酶活性比3日齡分別高204.72％(P＜0.05)和195.15％

8、(P＜0.05)；胰蛋白酶和糜蛋白酶活性也隨著日齡增加而升高，14日齡時胰蛋白酶、糜蛋白酶活性分別比3日齡和8日齡時高118.30％(P＜0.05)、58.94％(P＞0.05)和33.19％(P＞0.05)、68.94％(P＜0.05)。淀粉酶活性各日齡間差異不顯著。(2)空腸中主要消化酶活性3日齡空腸中脂肪酶活性比8日齡和14日齡時分別高93.65％(P＜0.05)和75.30％(P＜0.05)；胰蛋白酶和糜蛋白酶活性以8日齡時最高

9、，比3日齡和14日齡時分別高132.79％(P＜0.05)、363.83％(P＜0.05)和26.67％(P＞0.05)、71.16％(P＜0.05)；淀粉酶和總蛋白水解酶活性各日齡間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 胰腺中主要消化酶活性測定結(jié)果表明：3日齡胰腺中脂肪酶活性比8日齡和14日齡時分別高157.61％(P＜0.05)和163.34％(P＜0.05)；3日齡胰腺中胰蛋白酶、糜蛋白酶活性比8日齡和14日齡時分別高21.

10、33％(P＞0.05)、43.28％(P＜0.05)和44.93％(P＜0.05)、34.26％(P＞0.05)；胰腺中淀粉酶和總蛋白水解酶活性各日齡間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 對胰蛋白酶原基因和18S rRNA基因進行了克隆測序，試驗結(jié)果如下：胰蛋白酶原cDNA陽性克隆子測序后得到422bp的核苷酸序列。對獲得的鴿胰蛋白酶原cDNA部分核苷酸序列(Genbank登錄號為DQ503466)與已報道的雞、鴕鳥和褐家鼠等的

11、胰蛋白酶原cDNA序列比較，發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶原cDNA具有高度保守性，所比較的氨基酸序列的同源性也較高。
　　 18S rRNA cDNA陽性克隆子測序后得到193bp的核苷酸序列。對克隆得到的鴿的18S rRNA核苷酸序列與己報道的鴿、雞、鴨和白鷗等18S rRNA序列相比較，發(fā)現(xiàn)18S rRNA具有高度保守性，所比較的氨基酸序列的同源性也較高。
　　 采用RT—PCR方法研究了鴿胰腺中胰蛋白酶原基因表達量的變化。研究結(jié)果

12、表明：14日齡時胰蛋白酶原基因表達量比3日齡和8日齡分別高14.71％(P＞0.05)和77.27％(P＜0.05)，而8日齡時胰蛋白酶原基因表達量比3日齡下降了54.55％(P＜0.05)。
　　 本研究揭示：鴿乳中常規(guī)營養(yǎng)成分粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的含量隨著日齡增加下降，碳水化合物的量呈上升趨勢；氨基酸分析表明：必需氨基酸占總氨基酸的比例基本穩(wěn)定。乳鴿十二指腸內(nèi)容物中總蛋白水解酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶活性隨乳鴿日齡增加呈上升趨

13、勢，脂肪酶活性呈下降趨勢。乳鴿空腸內(nèi)容物中胰蛋白酶活性隨日齡增加先上升后下降，脂肪酶、糜蛋白酶活性呈下降趨勢。乳鴿胰腺中脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性隨乳鴿日齡增加呈下降趨勢。
　　 克隆得到的鴿胰蛋白酶原(Genbank登錄號DQ503466)cDNA和18S rRNAcDNA部分核苷酸序列與雞、鴨等物種的核苷酸序列具有很高的同源性，在生物進化上具有很近的親緣關(guān)系。0—14日齡乳鴿胰腺中胰蛋白酶原基因表達量隨日齡增加先下降后上