肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究及轉(zhuǎn)移風(fēng)險評估模型的建立.pdf

1、腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移是決定肺癌病人生存率的重要因素。目前已經(jīng)鑒定出許多腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的相關(guān)基因，但對腫瘤轉(zhuǎn)移的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。而且，目前尚沒有可有效用于臨床的肺癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子標(biāo)志物。
　　 本項研究以肺鱗癌為研究對象，在前期工作的基礎(chǔ)上共完成了82例肺鱗癌原發(fā)灶腫瘤組織的基因表達(dá)譜分析。根據(jù)手術(shù)時淋巴結(jié)是否受累將82例病例分為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組(pN+,43例)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組(pNO,39例)。統(tǒng)計分析共鑒定得到1027個

2、肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)差異表達(dá)基因(p≤0.05)。利用BioCarta信號通路數(shù)據(jù)庫對這些基因進(jìn)行注釋，發(fā)現(xiàn)了一組潛在的與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的信號通路。針對這些信號通路中的差異表達(dá)基因及與其表達(dá)顯著相關(guān)(p≤0.001)的基因構(gòu)建了共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)，并繼而采用體外實(shí)驗(yàn)對其進(jìn)行了生物學(xué)驗(yàn)證。
　　 根據(jù)所構(gòu)建的基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)的提示信息，我們進(jìn)一步選擇dlkl基因，對其與肺癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系進(jìn)行了深入研究。RT-PCR分析結(jié)果顯示，dlkl基

3、因在36.7％的非小細(xì)胞肺癌組織中異常表達(dá)。基于穩(wěn)定表達(dá)外源性dlkl基因的細(xì)胞模型的建立，體外實(shí)驗(yàn)表明，dlkl基因可以通過促進(jìn)cyclinBI的表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞的增殖能力；dlkl基因高表達(dá)可以顯著增強(qiáng)肺癌細(xì)胞的侵襲能力，而對細(xì)胞的遷移能力無明顯影響。進(jìn)一步對dlkl調(diào)節(jié)細(xì)胞侵襲的分子機(jī)理進(jìn)行探索發(fā)現(xiàn)，dlkl是通過激活NOTCH信號通路上調(diào)細(xì)胞中mmp9基因的表達(dá)及其蛋白活性形式的分泌，進(jìn)而增強(qiáng)細(xì)胞侵襲能力的；而分泌形式的DLK1蛋

4、白則可通過旁分泌途徑，上調(diào)周圍細(xì)胞中dlkl基因的表達(dá)。
　　 此外，我們利用實(shí)驗(yàn)室前期工作積累的23個潛在的肺癌相關(guān)標(biāo)志蛋白的免疫組織化學(xué)分析數(shù)據(jù)，以廣義線性模型以及遞歸分割決策樹算法，在319例患者中構(gòu)建了一個由8個蛋白組合而成的肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險評估預(yù)測模型。相對于組織病理學(xué)診斷，這一模型在“測試集”(test set)中的準(zhǔn)確率為76.6％，敏感性與特異性分別為76.0％與76.9％。
　　 綜上所述，本項研究