茯苓免疫功能性成分研究與質(zhì)量分析.pdf

1、茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核，寄生于松科植物赤松或馬尾松根莖，埋于土壤下20-30厘米繁衍而成。茯苓為傳統(tǒng)藥食兩用中藥，《神農(nóng)本草經(jīng)》將其列為上品，收載于歷版《中國藥典》。茯苓具有滲濕利尿、和胃健脾、寧心安神的功效；現(xiàn)代藥理學研究表明，茯苓有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、抗炎、抗過敏等方面的生物活性。其主要活性成分為茯苓多糖和三萜類化合物。
　　 為了進一步詮釋茯苓免疫調(diào)節(jié)功能物質(zhì)基礎和建

2、立該藥材與國際接軌的質(zhì)量評價體系，本論文在前期研究的基礎上，對其進行了調(diào)節(jié)免疫功能活性成分及質(zhì)量分析研究。
　　 本實驗室前期利用溶劑萃取法將茯苓藥材提取物分離成為不同物質(zhì)部位，藥理實驗表明，正丁醇萃取物質(zhì)部位具有顯著調(diào)節(jié)免疫功能活性。本論文采用大孔樹脂純化技術，將正丁醇萃取物質(zhì)部位分離為6個組分，從中篩選出4個免疫調(diào)節(jié)功能活性組分；采用現(xiàn)代色譜分離技術，從上述4個活性組分中分離得到12個單體成分；通過現(xiàn)代波譜分析方法，鑒定了其

3、中9個化合物，分別為(1)2-N-乙酰氨基-D-葡萄糖(N-Acetyl-D-glucosamine)，(2)L-脲苷(L-Uridine)，(3)D-吡喃木糖(D-Xylopyranose)，(4)6-0-α-D-吡喃甘露糖-D-葡糖糖(6-O-α-D-Mannopyranosyl-D-Glucose)，(8)3β，15α，16α-三羥基-羊毛甾-7，9(11)，24(31)-三烯-21-酸(15α-hydroxydehydrotum

4、ulosic acid)，(9)3β-乙酰氧基-16α-羥基-羊毛甾-8，24(31)-二烯-21-酸(Pachymic acid)，(10)3β-乙酰氧基-16α-羥基-羊毛甾-7，9(11)，24(31)-三烯-21-酸(Dehydropachymic acid)，(11)3β，16α-二羥基-羊毛甾-8，24(31)-二烯-21-酸(Tumulosic acid)，(12)3β-羥基羊毛甾-8，24-二烯-21-酸(3β-hydr

5、oxy-Lanosta-8,24-diene-21-oic-acid)等；藥理篩選結果表明，化合物(1)、(4)等具有免疫增強的生物活性，化合物(5)、(6)、(10)等具有免疫抑制的生物活性，而化合物(8)(9)(11)和(12)則表現(xiàn)出免疫雙向調(diào)節(jié)作用。這對于詮釋茯苓的藥效物質(zhì)基礎具有重要意義。
　　 采用現(xiàn)代分析方法，建立了茯苓藥材規(guī)范化的HPLC-ELSD指紋圖譜，測定了20批不同產(chǎn)地茯苓藥材的圖譜，標定了18個共有峰，

6、對其中10個指紋峰進行了歸屬。參照中藥指紋圖譜評價系統(tǒng)對不同產(chǎn)地茯苓藥材進行了分析，依據(jù)相似度大小，將各樣品進行了分類，指出了有較大差異的離散樣品，表明該指紋圖譜能有效地控制茯苓藥材的質(zhì)量。
　　 采用紫外分光光度法(UV)和高效液相色譜法(HPLC)，以茯苓多糖、茯苓酸和總?cè)坪繛樵u價指標，對茯苓藥材進行了有效物質(zhì)含量分析研究；同時以藥材色澤、致密度、水分、灰分等理化指標對其質(zhì)量進行比較，綜合分析結果表明，安徽岳西和霍山，湖