Ouabain誘導(dǎo)大鼠弱精子癥模型建立及睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌Ouabain的探索性研究.pdf

1、實驗一 Ouabain誘導(dǎo)大鼠弱精子癥模型建立的實驗研究
　　 目的：為探討Ouabain引起弱精子癥的病理機(jī)制，建立SD大鼠腹腔注射Ouabain誘導(dǎo)的弱精子癥動物模型。
　　 方法：健康性成熟SD雄性大鼠40只，隨機(jī)分為對照組10只(生理鹽水 10mg/kg/d)，低劑量實驗組15只(Ouabain 12.5ug/kg/d)，高劑量實驗組15只（Ouabain 25ug/kg/d），連續(xù)腹腔注射30d，觀察各組大鼠附

2、睪精子活力及活動率的變化，同時觀察本實驗劑量范圍的Ouabain對大鼠生殖系統(tǒng)及全身可能的毒性反應(yīng)。
　　 結(jié)果：與對照組相比，實驗組大鼠精子數(shù)量無明顯變化，精子活力及活動率顯著下降。高劑量及低劑量Ouabain組連續(xù)給藥30d后大鼠附睪精子活力分別為48.27％和44.73％，與對照組（73.33％）相比有顯著性差異（p＜0.01），且高、低劑量組間差異有顯著性（p＜0.01）；高、低劑量組大鼠精子活動率分別為52.26％和4

3、9.95％，與對照組（78.70％）相比有顯著性差異（p＜0.01），高、低劑量組間差異亦有顯著性（p＜0.01）；本試驗劑量范圍內(nèi)，Ouabain對大鼠生殖器官及全身重要臟器未顯示明顯的毒性反應(yīng)。
　　 結(jié)論：Ouabain經(jīng)腹腔注射給藥30d能成功誘導(dǎo)SD大鼠弱精子癥模型的建立，且未見明顯的生殖系統(tǒng)和全身毒性反應(yīng)。
　　 實驗二小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌Ouabain的探索性研究
　　 目的：檢測體外培養(yǎng)的睪丸間質(zhì)

4、細(xì)胞經(jīng)hCG、FSH干預(yù)后分泌Ouabain的功能，通過對小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞功能的研究來探討其與Ouabain及弱精子癥之間的關(guān)系。
　　 方法：體外培養(yǎng)小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞，用不同濃度的hCG（0U，4U，8U，16U，32U，64U，100U，200U）和FSH（0，5，10，20，50，100mU/ml）對小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，收集上清，ELISA競爭法檢測待測上清內(nèi)的Ouabain水平。
　　 結(jié)果：在hCG刺激下

5、的體外培養(yǎng)的小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞上清液中能夠檢測到Ouabain，在4U hCG作用下Ouabain水平為49.82pg/ml，在8U hCG作用下Ouabain水平增加為60.70 pg/ml，而在200U hCG作用下Ouabain水平達(dá)259.13 pg/ml；在一定濃度范圍FSH刺激作用下，體外培養(yǎng)小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞上清液中未能檢測到Ouabain。
　　 結(jié)論：小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞能夠合成Ouabain，且在一定劑量范圍內(nèi)分泌O