血管壓迫迷走神經(jīng)致神經(jīng)源性高血壓大鼠模型建立的研究.pdf

1、高血壓是常見的心血管疾病，是全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問題，據(jù)2002年調(diào)查資料顯示，我國成人高血壓患病率為18.8％，全國有高血壓患者約1.6億。藥物治療不能從根本上治愈該病，而且副作用大。原發(fā)性高血壓是常見病多發(fā)病，其并發(fā)癥如腦出血、腦梗塞、心臟病等嚴重威脅人類健康。
　　 目前，對高血壓病的深入研究已成為心腦血管研究領域中的熱點問題。為更深入地研究高血壓的發(fā)病機制及治療方法，動物實驗已成為其研究的重要手段，這一領域的發(fā)展十分

2、迅速。國內(nèi)外已成功復制出大鼠、犬、兔等多種高血壓動物模型，如腎源性，藥物源性，遺傳基因性，環(huán)境性和神經(jīng)源性等。在神經(jīng)源性高血壓動物模型方面，有人采用脈動球囊法，球囊置于延髓左側來建立高血壓動物模型。沈加林等在影像學成像技術指導下利用球囊固定動脈法，在延髓左側腹外側舌咽神經(jīng)、迷走神經(jīng)根入腦干區(qū)（REZ）形成神經(jīng)血管壓迫建立了犬神經(jīng)源性高血壓動物模型?，F(xiàn)有的研究操作較復雜，不適宜進行推廣研究?；诖艘约巴庵苌窠?jīng)干脫髓鞘血管壓迫致面肌痙攣的理

3、論，我們提出一種頸動脈鞘內(nèi)迷走神經(jīng)脫髓鞘后受血管搏動性壓迫導致的神經(jīng)源性高血壓（Neurogenic Hypete-nsion，NH）大鼠動物模型建立方法。
　　 目的：研究頸動脈鞘內(nèi)迷走神經(jīng)脫髓鞘后受血管搏動性壓迫導致的神經(jīng)源性高血壓（Neurogenic Hyperte-nsion，NH）大鼠動物模型建立方法。在較為接近生理的條件下形成神經(jīng)源性高血壓，為其形成和發(fā)展提供實驗基礎和實驗手段，為臨床選擇治療途徑提供可靠的動物模型

4、和實驗依據(jù)。
　　 方法：清潔級SD雄性大鼠50只，河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供，體重280-350g，隨機分為2組①假手術組（Sham operation group）25只。實驗僅將左側頸動脈鞘分離開；②手術組（Surgery group）25只。所有實驗動物均以10％水合氯醛腹腔注射麻醉（5mg·kg-1），取仰臥位，頸部常規(guī)消毒備皮，眼科剪刀在正中剪開，長約3cm，用2把眼科鑷嚴格按正中分離開胸鎖乳突肌，可見白色氣管，然

5、后在氣管左側順肌肉之間的纖維間隔進一步向下分離。深部可見纖維膜包裹的頸動脈鞘，內(nèi)有迷走神經(jīng)，用纖維鑷子小心撕開纖維膜并分離頸總動脈，長度約2cm，其次分離與之并行的迷走神經(jīng)主干約2cm，海棉墊于迷走神經(jīng)下方，形成包裹，利用5-0鉻制腸線，剪碎成1-2mm的小段，充分放置于迷走神經(jīng)周圍，濕潤海綿，使其包裹已經(jīng)被鉻制腸線包繞貼附的迷走神經(jīng)，觀察組織無活動性出血后，然后在頸總動脈旁置小塊滌綸棉片，大小約1.5cm×1.0cm，將其輕壓向迷走神

6、經(jīng)，并與神經(jīng)包裹在一起，固定于一側肌肉上，使其與之接觸，造成血管壓迫迷走神經(jīng)。再次觀察無活動性出血，血管波動良好時，逐層縫合皮下及皮膚，碘伏酒精消毒2遍，放置于恢復箱待清醒。所有大鼠術前1周及術后1，3，6周分別測定血管（頸總動脈）壓迫組及假手術組手術前后鼠尾動脈，尾壓測量應用LE-5001（西班牙）大鼠尾壓測量儀，測量測定脈率，血壓，連續(xù)測量10次，取平均值。并在術后3周，6周分別測定血中腎素（PRA）-血管緊張素（AngⅡ）-醛固酮

7、（ALD）系統(tǒng)的變化。所有大鼠均于測定血液中以上指標完成后2天，生理活動穩(wěn)定后，在麻醉狀態(tài)下活體快速取出左側迷走神經(jīng)，長度約2cm，固定后超薄切片，標本在透射電鏡（日立H2500）下觀察。
　　 結果：
　　 1本組實驗大鼠共50只，10只于實驗過程死亡，其中1只（假手術組）死于麻醉意外，2只（手術組）死于手術出血過多死亡，3只（其中2只為假手術組）死于飼養(yǎng)過程中。4只死于眶后靜脈取血后。
　　 2血壓改變（收縮

8、壓）
　　 假手術組術后1周，3周，6周大鼠收縮壓與術前比較均無顯著性差別（P>0.05）。假手術組與手術組術前收縮壓無顯著性差別（P>0.05）。手術組術后1周大鼠收縮壓與術前無顯著性差別（P>0.05）；3周有升高趨勢，但是無顯著性差別（P>0.05）；手術組術后6周大鼠收縮壓與術前比較有顯著性升高（P<0.01）。假手術組與手術組1周，3周收縮壓均無顯著性差別（P>0.05）；假手術組與手術組6周收縮壓有顯著性差別（P<0

9、.01）。（Table1， Fig.7）
　　 3脈率
　　 假手術組術后1周，3周，6周大鼠脈率與術前比較均無顯著性差別（P>0.05）。手術組術后1周，3周，6周大鼠脈率與術前比較均無顯著性差別（P>0.05）。假手術組與手術組6周脈率無顯著性差別（P>0.05）。（Table2，F(xiàn)ig.8）
　　 4血液指標
　　 手術組術后大鼠血漿腎素（PRA）-血管緊張素（AngⅡ）-醛固酮（ALD）系統(tǒng)水平均

10、比術前明顯升高，有統(tǒng)計學意義（P>0.05），但是假手術組手術前后無明顯統(tǒng)計學差異（P>0.05）。（Table3，F(xiàn)ig.9-11）
　　 5組織學表現(xiàn)
　　 電鏡下觀察結果顯示：手術組血管壓迫組迷走神經(jīng)，板層排列紊亂，水腫。施萬細胞核膜局部缺損，線粒體內(nèi)膜融合消失，胞質水腫、（Fig.12-14）；而假手術組未見明顯迷走神經(jīng)脫髓鞘改變。（Fig.15）
　　 結論：
　　 1本實驗使用鉻線對迷走神經(jīng)進

11、行脫髓鞘處理并血管壓迫，類似于迷走神經(jīng)根區(qū)神經(jīng)髓鞘缺如，近似于血管壓迫致神經(jīng)源性高血壓的機理。
　　 2手術只需打開頸動脈鞘，操作方法簡便，易于推廣，屬國內(nèi)外首創(chuàng)。
　　 3該動物模型方法可以使大鼠血壓升高，6周時已經(jīng)十分明顯；檢測血漿腎素（PRA）-血管緊張素（AngⅡ）-醛固酮（ALD）系統(tǒng)水平均比術前明顯升高，有統(tǒng)計學意義。效果可靠，具有科學性，可行性。
　　 4該動物模型方法為神經(jīng)源性高血壓的臨床診斷及病