迷走神經調節(jié)胰腺外分泌的神經傳遞機制的研究.pdf

1、胰腺為人體重要的器官，兼有外分泌和內分泌的功能。其外分泌的產物胰酶是重要的食物水解酶。目前大多數的胰腺疾病都會引起胰腺外分泌功能的改變，因而機體如何調節(jié)胰腺外分泌液備受重視。目前對于胰腺外分泌的研究認為：胰腺外分泌由體液因素和神經因素共同調節(jié)，且兩者間有相互的作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)CCK、促胰液素和許多物質對胰腺外分泌的調節(jié)均與乙酰膽堿能神經有著密切的關系，因此對于胰腺外分泌的神經調節(jié)的研究是非常必要的。而在胰腺外分泌的神經調控中，迷走神

2、經和迷走神經背核起到了重要的作用，因此本項研究主要就針對這二者進行胰腺外分泌的神經傳遞機制的研究。 1.腸道灌注5-HT后迷走神經節(jié)c-Fos、谷氨酸受體、P物質受體的表達目的：本部分實驗主要探討生理狀態(tài)下，大鼠十二指腸受到不同灌注刺激后，迷走神經節(jié)神經元的活動性。方法：實驗分四組：假手術，灌注去離子水，灌注5％的NaCl，灌注10-4mol/L的5-HT，每組10只，在十二指腸內恒流灌注相同時間，假手術組不灌注，然后對迷走神經

3、節(jié)切片進行c-Fos免疫組化染色，和c-Fos-NK1-R和c-Fos-NMDA-R2ab雙重免疫組化染色，統(tǒng)計分析。結果：灌注5％的NaCl和灌注10-4mol/L的5-HT組的迷走神經節(jié)切片出現(xiàn)顯著的c-Fos陽性結果，并且伴有NK1-R、NMDA-R2ab的大量表達。結論：在大鼠十二指腸的灌注中，5％的NaCl和10-4mol/L的5-HT可以將迷走神經通路上傳到迷走神經節(jié)，并且表達谷氨酸和P物質受體。 2.迷走神經背核(

4、DMN)逆向追蹤研究目的：本部分實驗主要探討生理狀態(tài)下，胰腺中注射有CTB熒光標記的大鼠十二指腸受到10-4mol/L的5-HT灌注刺激后，迷走神經背核(DMN)的神經元的活動性。方法：實驗分三組：A組10只，注射CTB，有灌注；B組1只，注射CTB，無灌注；C組1只，注射生理鹽水，有灌注。然后對迷走神經背核的切片進行CTB雙重免疫染色，并對c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab的表達進行熒光染色。結果：A組：CTB陽性，

5、c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab均陽性；B組：CTB陰性，其他也為陰性；C組：CTB陰性，其他均為陽性。結論：十二指腸5-HT的灌注，引起胰腺神經元將信號通過迷走神經傳遞給DMN。信號傳遞給DMN的過程中，伴隨著c-Fos、ChAT、NK1-R、NMDA-R2ab的高表達。 3.SP、NPY、SS在迷走神經運動背核中對胰腺外分泌的調節(jié)作用目的：觀察迷走神經背核微量注射SP、NPY、SS，對胰腺神經元的影響。方

6、法：實驗分四組：A組10只，注射人工腦脊液；B組10只，注射P物質(SP)；C組10只，注射神經肽Y(NPY)；D組10只，注射生長抑素(SS)。然后對胰腺的切片進行c-Fos免疫組化染色，并對ChAT、GRP的表達進行雙重熒光染色。結果：SP和NPY能夠促進胰腺內神經元的c-Fos表達，并伴有ChAT、GRP的高表達；SS抑制胰腺內神經元的c-Fos表達，而且ChAT、GRP也較少表達。結論：SP和NPY作用于迷走神經背核能促進胰腺的