雷公藤甲素對實驗性視神經(jīng)炎抗炎作用及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：觀察雷公藤甲素（Triptolide，TP）對實驗性視神經(jīng)炎大鼠視神經(jīng)及視網(wǎng)膜的抗炎作用，并探討其可能機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 方法：45只雌性SD大鼠，隨機(jī)分成正常組5只、實驗對照組（EAE組）、雷公藤甲素組（TP組）、地塞米松組（DXM組）和聯(lián)合用藥組（TP+DXM組）各10只。豚鼠脊髓生理鹽水勻漿加等量的完全福氏佐劑（Complete Freund Adjuvant，CFA）作為免疫抗原，建立大鼠EAE模型。于

2、免疫當(dāng)天至第14天TP組、DXM組及聯(lián)合用藥組經(jīng)腹腔分別注射40ug TP/d、1mgDXM/d和20ug TP+0.5mgDXM/d。EAE組則用同樣方法注射等量生理鹽水。觀察各組大鼠的發(fā)病情況并評分，于免疫后第18天取材，光鏡下觀察視神經(jīng)及視網(wǎng)膜病理改變，免疫組化染色測定視網(wǎng)膜中GFAP、NF-KBp65、MCP-1以及caspase-3的表達(dá)，TUNEL法檢測RGCs凋亡。 結(jié)果：1.發(fā)病情況：EAE組、TP組、DXM組臨

3、床評分分別為2.93±0.68，1.80±0.35，2.19±0.53，TP組、DXM組與EAE組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。聯(lián)合用藥組為1.21±0.36，與EAE組比較差別具有顯著意義（P<0.01）。發(fā)病時間：EAE組11.44±1.71d，TP組、DXM組及聯(lián)合用藥組各組大鼠發(fā)病時間分別為14.02±0.62d、13.00±0.89d、15.99±0.56d，與EAE組比較有顯著差異性（P<0.01）。聯(lián)合用藥組與TP組、

4、DXM組比較P<0.05。 2.正常組視神經(jīng)橫切面呈類圓形，縱切面神經(jīng)纖維均勻排列，染色均勻，其間散在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，無炎性細(xì)胞侵潤。EAE大鼠視神經(jīng)軸突不規(guī)則腫脹，部分軸突變性降解。網(wǎng)狀分層形成大量空泡，可見不同程度的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞侵潤，神經(jīng)纖維斷裂不連續(xù)，軸突數(shù)目較正常組明顯減少，脫髓鞘。正常視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)清晰，神經(jīng)纖維層厚度正常，節(jié)細(xì)胞層呈單層條帶狀排列，EAE大鼠RGCs層輕度水腫，細(xì)胞數(shù)量減少。 3.正常大鼠視網(wǎng)

5、膜內(nèi)界膜下和神經(jīng)纖維層可見少許棕色陽性GFAP纖維，GFAP的表達(dá)主要集中在RGCs的胞膜及其纖維的周圍，在EAE大鼠視網(wǎng)膜各層均可見GFAP陽性纖維，貫穿于視網(wǎng)膜全層。TP組、DXM組以及聯(lián)合用藥組GFAP的表達(dá)明顯減少，與EAE組比較有顯著差異性（P<0.01）。 4.正常組NF-KBp65少量表達(dá)于胞漿中，NF-KBp65在EAE大鼠RGCs核中表達(dá)，TP組、DXM組以及聯(lián)合用藥組NF-KBp65表達(dá)較EAE組明顯降低P<

6、0.01。正常組視網(wǎng)膜中未見MCP-1的表達(dá)，EAE組中呈強(qiáng)表達(dá)，TP組、中表達(dá)較EAE組低，差別有顯著意義（P<0.01），TP組、DXM組與聯(lián)合用藥組比較P<0.05。 5.正常組大鼠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層幾乎未見caspase-3及凋亡細(xì)胞，EAE組凋亡細(xì)胞明顯，DXM組凋亡細(xì)胞較EAE組高，聯(lián)合用藥組節(jié)細(xì)胞的凋亡較DXM組減低，與EAE組比較無明顯差異（P>0.05）。 結(jié)論：（1）雷公藤甲素減輕視神經(jīng)的脫髓鞘反應(yīng)，推遲E