下頜前移矯治對(duì)OSAS兔GG功能結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立新西蘭大白兔阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome，OSAHS）的動(dòng)物模型，研究OSAHS對(duì)頦舌肌(genioglossus，GG)功能結(jié)構(gòu)的影響，探討下頜前移矯治器（mandible advanced device，MAD）治療后GG的改變。為臨床研究MAD治療OSAHS對(duì)GG的影響提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 動(dòng)物分組：3

2、0只純種新西蘭大白兔，6月齡，雄性，隨機(jī)分為3組，每組10只，分別為阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征組(Group OSAHS)、下頜前移矯治器組(Group MAD)和對(duì)照組(control group)。
　　 模型建立：OSAHS組和MAD組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于1％戊巴比妥鈉行全身麻醉后，在軟腭中距軟硬腭交界0.5cm處粘膜下肌層注射聚丙烯酰胺水凝膠1-2ml。注射后，動(dòng)物仰臥位出現(xiàn)明顯打鼾和間斷的呼吸暫停，頭顱側(cè)位片顯示軟腭后緣1

3、/4點(diǎn)、1/2點(diǎn)、3/4點(diǎn)處上氣道寬度較對(duì)照組明顯減小，發(fā)生睡眠呼吸暫停時(shí)動(dòng)脈血?dú)夥治鲲@示血氧飽和度較對(duì)照組降低了22％，上述表明OSAHS動(dòng)物模型建立成功。
　　 MAD組在建模成功后，取印模，制作并配戴上前牙斜面導(dǎo)板矯治器，導(dǎo)下頜向前。
　　 睡眠觀察：建模2天后，三組動(dòng)物每天上午以5-6ml/kg劑量經(jīng)口灌注10％水合氯醛，仰臥位睡眠4-6小時(shí)，持續(xù)8周。
　　 上氣道間隙測(cè)量：分別對(duì)三組動(dòng)物拍仰臥位頭顱側(cè)

4、位片進(jìn)行上氣道間隙分析，取軟腭后緣最上點(diǎn)、1/4點(diǎn)、1/2點(diǎn)、3/4點(diǎn)和最下點(diǎn)的五個(gè)位點(diǎn)，進(jìn)行上氣道間隙測(cè)量。
　　 動(dòng)脈血?dú)夥治觯貉雠P位睡眠發(fā)生呼吸暫停時(shí)，分別抽取三組動(dòng)物耳緣動(dòng)脈血1ml進(jìn)行血?dú)夥治觥?br>　　 體外收縮能力測(cè)量：8周后，三組動(dòng)物在1％戊巴比妥鈉全麻下，暴露并分離頦舌肌，迅速剝離并制備成直徑2mm的縱向肌條，肌條一端結(jié)扎固定在浴槽底部固定鉤上，另一端與高度敏感的張力換能器相連，懸掛于恒溫37℃含95％O2

5、和5％CO2的生理溶液浴槽里，pH值調(diào)至7.40。平衡30分鐘后，由鉑電極產(chǎn)生刺激，測(cè)量單收縮的最大收縮張力、收縮時(shí)間、半舒張時(shí)間、刺激頻率分別為10Hz、20Hz、40H、60Hz、80H、100H時(shí)的張力-頻率關(guān)系。休息10分鐘后，進(jìn)行頦舌肌誘導(dǎo)疲勞試驗(yàn)，給予0.5Hz的連續(xù)刺激，持續(xù)時(shí)間5分鐘，每間隔1分鐘記錄持續(xù)時(shí)間為300毫秒單刺激下的肌張力。
　　 肌纖維型測(cè)定：取5mm×5mm×3mni大小頦舌肌組織，立即置于異戊

6、烷/液氮中快速冷凍，-80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩Ｓ肁TP酶染色（鈣鈷激活法）進(jìn)行Ⅰ、Ⅱ型肌纖維型測(cè)定。
　　 軟腭HE染色：取下凝膠注射部位軟腭組織，固定于10％福爾馬林中，石蠟切片，常規(guī)HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1.上氣道間隙測(cè)量：OSAHS組軟腭后1/4點(diǎn)、1/2點(diǎn)和3/4點(diǎn)上氣道間隙均較M

7、AD組、對(duì)照組明顯減小，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);MAD組與對(duì)照組比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.血?dú)夥治觯篛SAHS組較MAD組、對(duì)照組的血氧飽和度、氧分壓和pH值均顯著降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，二氧化碳分壓較MAD組、對(duì)照組顯著升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);MAD組較對(duì)照組比較以上各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　 3.體外收縮能力：三組間頦舌肌單收縮的最

8、大收縮張力，收縮時(shí)間，半舒張時(shí)間沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)，三組間頦舌肌的張力-頻率關(guān)系也沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)，但在疲勞試驗(yàn)過(guò)程中，OSAHS組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力比值分別為88.20±4.80％、64.80±6.58％、57.30±4.24％、37.10±3.38％、28.30±3.50％,MAD組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力

9、比值分別為94.30±3.33％、83.10±3.51％、71.60±4.01％、55.40±2.95％、45.70±6.27％,對(duì)照組在1min、2min、3min、4min、5min時(shí)GG收縮張力與初始張力比值分別為98.80±7.33％、87.70±4.50％、74.20±4.99％、52.00±5.10％、48.20±4.10％,OSAHS組較對(duì)照組頦舌肌易疲勞性明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而MAD組與對(duì)照組比較

10、，頦舌肌疲勞性無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　 4.肌纖維分型：光學(xué)顯微鏡下觀察，100倍物鏡下纖維計(jì)數(shù)顯示OSAHS組Ⅱ型纖維（易疲勞性纖維）比例為85.64±3.03％，較對(duì)照組Ⅱ型纖維（易疲勞性纖維）比例78.70±3.34％增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而對(duì)照組與MAD組(80.21±2.07％)之間沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05)。
　　 5.血氧飽和度與頦舌肌疲勞性相關(guān)分析：二者在各時(shí)間點(diǎn)均呈明顯

11、的正相關(guān)，其中在疲勞實(shí)驗(yàn)中的第2分鐘時(shí)相關(guān)系數(shù)最大，r=0.773，P＜0.001，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 6.軟腭組織學(xué)觀察：肉眼觀察軟腭凝膠注射部位，呈白色透明狀，質(zhì)韌且有彈性，邊界清楚，未見(jiàn)向周圍組織擴(kuò)散，白色膠狀物外有完整包膜。光鏡下可見(jiàn)凝膠藍(lán)染，呈交聯(lián)狀，有纖維膜包繞，沒(méi)有引起周圍組織炎癥、壞死等不良反應(yīng)，也未見(jiàn)對(duì)鄰近組織的損傷。
　　 結(jié)論：OSAHS可導(dǎo)致GG疲勞性增加，下頜前移矯治器治療OSAHS，能預(yù)防