死亡受體（DR4）和類甲酰肽受體1（FPRL1）相互作用的研究.pdf

1、腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體(TRAIL)發(fā)現于1995年，是腫瘤壞死因子(TNF)超家族的成員，它能夠特異地誘導腫瘤細胞凋亡而對大多數正常細胞沒有毒性。已經發(fā)現其有五種受體：死亡受體DR4和DR5、誘騙受體DcR1、DcR2和游離型受體OPG。類甲酰肽受體1(FPRL1)是本實驗室采用酵母雙雜交技術以DR4的胞內區(qū)為誘餌，從人白細胞cDNA文庫中篩選到的。本研究使用GSTpull-down實驗和在THP-1細胞中進行內源性免疫共沉淀

2、實驗證明了DR4和FPRL1在體內體外都可特異性結合。我們進而從人白細胞中提取總RNA，以RT-PCR擴增出FPRL1，構建真核表達載體FPRL1/pcDNA6-V5-HisB-HA，轉染HeLa細胞，得到穩(wěn)定表達FPRL1的細胞株。發(fā)現FPRL1高表達使Hela細胞抵抗TRAIL誘導的細胞凋亡，證明FPRL1參與TRAIL的信號傳遞。同時，我們發(fā)現DR4的激動劑TRAIL能夠促進THP-1細胞向FPRL1的激動劑W肽的趨化作用；TRA

3、IL和W肽都可以激活細胞內的激酶ERK和AKT，兩者共同處理對于激活ERK和AKT以及細胞內Ca離子流動均具有協同作用，提示TRAIL/DR4介導的信號通路與W肽/FPRL1介導的信號通路之間存在交叉對話(cross-talk)。 在THP-1細胞和人中性粒細胞中，我們還首次證明W肽可以促進內源性的TRAIL表達，NF-κB的特異性抑制劑LLnL則可以抑制TRAIL表達，提示W肽促進內源性的TRAIL表達是受NF-κB調控的；在