β-,2--腎上腺素受體與藥物相互作用的研究.pdf

1、受體是藥物作用的主要靶點(diǎn)，研究受體與藥物間的相互作用對于理解在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)領(lǐng)域中涉及到的分子之間的相互作用以及相互識(shí)別過程具有重要意義。β2-腎上腺素受體(β2-adrenceptor，β2-AR)是G蛋白偶聯(lián)的7次跨膜受體蛋白家族的成員之一，為常用止咳平喘藥物發(fā)揮藥效的主要靶體。本文采用固定化β2-AR親和色譜法做了以下幾點(diǎn)工作： (1)采用親和層析色譜法從家兔的肺組織中分離純化出β2-AR，以溫和的化學(xué)鍵合路線將β2

2、-AR固載于硅膠表面，制成β2-AR親和色譜固定相。用前沿色譜法測定了硫酸沙丁胺醇、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸腎上腺素和鹽酸普萘洛爾與β2-AR的結(jié)合常數(shù)。結(jié)果表明，固定化β2-AR與藥物的結(jié)合常數(shù)順序與放射免疫法結(jié)果相符，說明β2-AR經(jīng)過純化，固定化，裝柱等操作后，依然保持其原有的活性。 (2)采用競爭沈脫法研究了鹽酸巴馬汀和鹽酸藥根堿與β2-AR的相互作用。結(jié)果表明，鹽酸巴馬汀與β2-AR只有一類結(jié)合位點(diǎn)，在流動(dòng)相pH 7

3、.2，溫度25℃時(shí)鹽酸巴馬汀與β2-AR的結(jié)合常數(shù)為2.93×104L/mol；鹽酸藥根堿與β2-AR有兩類結(jié)合位點(diǎn)，在這兩類結(jié)合位點(diǎn)上的結(jié)合常數(shù)分別為1.93×104和1.56x105L/mol，兩類結(jié)合位點(diǎn)數(shù)的比值為93：7，且鹽酸巴馬汀和鹽酸藥根堿競爭低親和力的結(jié)合位點(diǎn)。 (3)研究了溫度及流動(dòng)相組成對鹽酸巴馬汀和鹽酸藥根堿與β2-AR之間相互作用的影響。結(jié)果表明，這兩種藥物與β2-AR之間的作用主要受靜電力驅(qū)動(dòng)，而疏水力