恩度對胃癌細(xì)胞NCI-N87增殖凋亡以及上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響.pdf

1、背景及目的：人重組血管內(nèi)皮抑制素(Endostatin，恩度)是特異性的血管內(nèi)皮生長因子，大量研究提示其通過抑制腫瘤的新生血管起到抑制腫瘤生長的作用。在我國，胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，由于缺乏有效的治療藥物，五年生存率較低。相關(guān)研究提示胃癌的新生血管較周圍組織增多，且程度與其生長、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，因此應(yīng)用恩度治療胃癌可能具有良好的效果。本實驗通過MTT法檢測恩度對于NCI-N87人胃癌細(xì)胞的抑制效應(yīng)，并觀察恩度作用后細(xì)胞凋亡率的改

2、變及對Snail和E-cadherin蛋白表達(dá)的影響，初步探討恩度對于胃癌的抑制效應(yīng)及機制，為臨床應(yīng)用提供理論和實驗依據(jù)。
　　 方法：將體外培養(yǎng)的NCI-N87人胃癌細(xì)胞用恩度干預(yù)后，通過MTT比色法檢測恩度對NCI-N87增殖的影響，流式細(xì)胞儀和Transwell侵襲試驗檢測細(xì)胞凋亡和侵襲力的改變，Western blot檢測snail、E-cadherin表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：(1)恩度對NCI-N87細(xì)胞增殖

3、的影響恩度對NCI-N87細(xì)胞的增殖表現(xiàn)出抑制作用，且呈劑量依賴性，隨著恩度濃度增加，抑制率顯著增加。
　　 (2)恩度對NCI-N87細(xì)胞凋亡的影響對照組細(xì)胞凋亡率為4.43％，與對照組比較，實驗組細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增加，凋亡率為32.83％，而且細(xì)胞周期阻滯于G1期(78.64％)，S期細(xì)胞減少，僅占3.17％。對照組與實驗組間比較具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 (3)Transwell體外侵襲試驗 Transw

4、ell小室培養(yǎng)細(xì)胞24h后，對照組NCI-N87細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)為215.65+4.041，恩度組穿膜細(xì)胞數(shù)為121.33士5.859，兩者相比差異具有顯著性(p<0.05)。
　　 (4)恩度作用后NCI-N87細(xì)胞Snail和E-cadherin表達(dá)的改變Western-blot檢測發(fā)現(xiàn)，對照組見明亮Snail和微弱的E-cadherin印跡：恩度組與對照組相比，Snail印跡減弱，E-cadherin印跡增強。